堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體(antibody,Ab)是機(jī)體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的特異性球蛋白,稱(chēng)免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原性的不同,可將為類(lèi)Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大類(lèi)。由遺傳基因決定所產(chǎn)生的抗體,稱(chēng)天然抗體(natural antibody),由抗原激發(fā)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,稱(chēng)免疫抗體(immune antibody)或稱(chēng)特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類(lèi)型。
檢測(cè)病原體常用的堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體有人工制備的特異性多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類(lèi)型。
操作步驟:
1取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。
2含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后(確認(rèn)pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。
3用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無(wú)蛋白檢出。
4加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復(fù)三次。測(cè)定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測(cè)純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。
5洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6濃縮到所需體積,加入50%甘油;測(cè)定效價(jià)后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。
相關(guān)產(chǎn)品如下:hz-7761R Myosin VIIa/DFNB2 肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2抗體
hz-7762R Factor X *10抗體
hz-7763R NIR2 膜磷脂轉(zhuǎn)移蛋白1抗體
hz-7764R NUSAP1 核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體
hz-7765R RAB35 RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab35抗體
hz-7766R RACGAP1 Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體
hz-7767R phospho-RACGAP1(Ser387) 磷酸化Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體
hz-7768R RCC2 染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2抗體
hz-7769R SEPT1 細(xì)胞分化蛋白SEP1抗體
hz-7770R SEPT10 細(xì)胞分化蛋白SEPT10抗體
hz-7771R SEPT12 細(xì)胞分化蛋白SEPT12抗體
hz-7772R SEPT14 細(xì)胞分化蛋白SEPT14抗體
hz-7773R SPECC1L 細(xì)胞質(zhì)和紡錘體機(jī)化蛋白A抗體
hz-7774R Septin 3 神經(jīng)元特異性蛋白3抗體
hz-7776R UCHL5IP 泛素羧基末端水解酶5互相作用蛋白1抗體
hz-7777R VPS4a 液泡分選蛋白4抗體
hz-7778R APC5 細(xì)胞分裂周期蛋白5抗體
hz-7779R BRD7 鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體
hz-7780R BRRN1/CAPH 染色體相關(guān)蛋白H抗體
hz-7781R CDC123/C10orf7 細(xì)胞分裂周期蛋白CDC123抗體
hz-7782R CCDC16/zinc finger protein 830 鋅指蛋白830抗體
hz-7783R CDC20B 細(xì)胞分裂周期蛋白20B抗體
hz-7784R ccnb1ip1 周期蛋白B1結(jié)合蛋白1抗體
hz-7785R CDC45L 細(xì)胞分裂周期調(diào)控蛋白45抗體
hz-7786R CDCA2 細(xì)胞分裂周期蛋白2抗體
hz-7787R CEP152 中心體蛋白152抗體
hz-7788R CEP76 中心體蛋白質(zhì)76抗體
hz-7789R CHMP1B 染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體
hz-7790R CIRBP 冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體