檢測(cè)原理昆明鏈霉菌
細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死，其細(xì)胞DNA均發(fā)生斷裂，細(xì)胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細(xì)胞DNA斷裂點(diǎn)均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細(xì)胞的DNA斷裂點(diǎn)為無(wú)特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細(xì)胞的死亡，并可與壞死細(xì)胞區(qū)別，細(xì)胞繁殖以分裂方式進(jìn)行。細(xì)胞作為一個(gè)獨(dú)立生命單位，既有生長(zhǎng)繁殖，也有衰老死亡。細(xì)胞衰老是生物有機(jī)體衰老的基礎(chǔ)。在多細(xì)胞生物的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細(xì)胞，如肌細(xì)胞、紅細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等都屬于高度分化的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，細(xì)胞便喪失其原來(lái)正常的功能，并無(wú)休止地分裂，形成腫瘤。
昆明鏈霉菌操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周?chē)郑?/span>50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周?chē)郑?/span>50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無(wú)色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時(shí)間 | 15~20天 |
傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細(xì)胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來(lái)。
6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來(lái)。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz0300 胃腺癌細(xì)胞（低分化）
hz0301 胃腺癌細(xì)胞,SGC-7901細(xì)胞
hz0302 胃腺癌細(xì)胞,AGS細(xì)胞
hz0303 胃癌細(xì)胞,MKN-74細(xì)胞
hz0304 胃癌細(xì)胞,MKN28細(xì)胞
hz0305 胃癌細(xì)胞,MGC80-3細(xì)胞
hz0306 胃癌細(xì)胞,MFC細(xì)胞
hz0310 團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞,WCF細(xì)胞
hz0311 兔子垂體細(xì)胞
hz0312 兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,SMC細(xì)胞
hz0313 兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,CCC-SMC-2細(xì)胞
hz0314 兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞,RYTF細(xì)胞
hz0315 兔腎細(xì)胞系 RK-13細(xì)胞
hz0316 兔晶體上皮細(xì)胞永生系 N/N1003A（RLE）細(xì)胞
hz0317 兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞,RCFBF細(xì)胞
hz0318 兔肝癌細(xì)胞,VX2細(xì)胞,
hz0319 兔成骨C IF細(xì)胞
hz0330 糖化酵母
hz0331 胎盤(pán)絨毛癌細(xì)胞,JAR細(xì)胞
hz0332 胎兒骨髓間充質(zhì)細(xì)胞,FBM細(xì)胞
hz0340 鼠雜交骨髓瘤細(xì)胞,K6H6/B5細(xì)胞
hz0341 鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞株 L-MTK細(xì)胞
hz0342 鼠小腦細(xì)胞,C8-D1A細(xì)胞
hz0343 鼠纖維肉瘤細(xì)胞系 WEHI 164細(xì)胞
hz0344 鼠細(xì)胞系 B82細(xì)胞
hz0345 鼠傷*
hz0346 鼠乳腺癌細(xì)胞系 MA-782細(xì)胞
hz0347 鼠肉瘤細(xì)胞,S-180-S2D9細(xì)胞
hz0348 鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T3-Swiss細(xì)胞,
hz0349 鼠胚成纖維細(xì)胞系 STO細(xì)胞
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