檢測原理克雷伯肺炎桿菌
細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死，其細(xì)胞DNA均發(fā)生斷裂，細(xì)胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細(xì)胞DNA斷裂點(diǎn)均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細(xì)胞的DNA斷裂點(diǎn)為無特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細(xì)胞的死亡，并可與壞死細(xì)胞區(qū)別，細(xì)胞繁殖以分裂方式進(jìn)行。細(xì)胞作為一個(gè)獨(dú)立生命單位，既有生長繁殖，也有衰老死亡。細(xì)胞衰老是生物有機(jī)體衰老的基礎(chǔ)。在多細(xì)胞生物的個(gè)體發(fā)育過程中，細(xì)胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細(xì)胞，如肌細(xì)胞、紅細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等都屬于高度分化的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，細(xì)胞便喪失其原來正常的功能，并無休止地分裂，形成腫瘤。
克雷伯肺炎桿菌操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時(shí)間 | 15~20天 |
傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細(xì)胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來。
6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz0767 人胚腎上皮包裝細(xì)胞,GP2-293細(xì)胞
hz0768 人胚腎上皮包裝細(xì)胞,GP2-293Luc細(xì)胞
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hz0770 人胚肝細(xì)胞正常 QSG-7701細(xì)胞
hz0771 人胚肝二倍體細(xì)胞,CCC-HEL-1細(xì)胞
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hz0773 人胚肺細(xì)胞,MRC-5細(xì)胞,
hz0774 人胚肺二倍體細(xì)胞,HLF-02細(xì)胞
hz0775 人胚肺成纖維細(xì)胞突變癌細(xì)胞,Z-HL16C細(xì)胞
hz0776 人胚肺成纖維細(xì)胞,WI-38細(xì)胞
hz0777 人胚肺成纖維細(xì)胞,MRC-5細(xì)胞
hz0778 人胚肺成纖維細(xì)胞,MRC-5-EGFP+puro細(xì)胞
hz0779 人胚肺成纖維細(xì)胞,HLF細(xì)胞
hz0780 人胚肺成纖維細(xì)胞,HFL-I細(xì)胞
hz0781 人胚肺成纖維細(xì)胞,HFL1細(xì)胞
hz0782 人胚肺成纖維細(xì)胞,HELF細(xì)胞
hz0783 人胚肺成纖維細(xì)胞,CCC-HPF-1細(xì)胞
hz0784 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,U-87MG細(xì)胞
hz0785 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87MG-EGFP細(xì)胞
hz0786 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-118 MG細(xì)胞
hz0787 人腦星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞,U251細(xì)胞,
hz0788 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞（H4） H4細(xì)胞
hz0789 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,U-373MG-EGFP細(xì)胞
hz0790 人腦瘤細(xì)胞,SF767細(xì)胞
hz0791 人腦瘤細(xì)胞,SF17細(xì)胞
hz0792 人腦瘤細(xì)胞,SF126細(xì)胞
hz0793 人腦膠質(zhì)細(xì)胞株（正常）HEB細(xì)胞
hz0794 人腦膠質(zhì)細(xì)胞株 HEB細(xì)胞
hz0795 人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,TG-905細(xì)胞
hz0796 人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,SW038-C2細(xì)胞
hz0797 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U373細(xì)胞
hz0798 人腦多形性膠質(zhì)瘤細(xì)胞,BT-325細(xì)胞
hz0799 人男性正常龜頭細(xì)胞系 HS68細(xì)胞
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