檢測原理高轉(zhuǎn)移肺癌細胞,95-D細胞
細胞發(fā)生凋亡或壞死,其細胞DNA均發(fā)生斷裂,細胞內(nèi)小分子量DNA斷增加,高分子DNA減少,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細胞DNA斷裂點均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間,出現(xiàn)180-200bpDNA斷,而壞死細胞的DNA斷裂點為無特征的雜亂片斷,利用此特征可以確定群體細胞的死亡,并可與壞死細胞區(qū)別,細胞繁殖以分裂方式進行。細胞作為一個獨立生命單位,既有生長繁殖,也有衰老死亡。細胞衰老是生物有機體衰老的基礎。在多細胞生物的個體發(fā)育過程中,細胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細胞,如肌細胞、紅細胞和神經(jīng)細胞等都屬于高度分化的細胞。當細胞發(fā)生癌變時,細胞便喪失其原來正常的功能,并無休止地分裂,形成腫瘤。
高轉(zhuǎn)移肺癌細胞,95-D細胞操作方法
固定 | 培養(yǎng)細胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后,用80%酒精再固定2h(-20℃)。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液,搖床上洗滌5min,三次。 |
反應 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細胞或組織周圍水分,按50μl/cm2滴加反應液(每50μL反應液含TdT酶0.5μL,標記的-dUTP 1μL),使反應液均勻地覆蓋于所有細胞或組織切片上,蓋上塑料蓋玻片,置濕盒中,37℃孵育1h。 |
終止反應 | 去掉塑料蓋玻片,將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi),洗滌兩次,每次5min。 |
FITC標記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細胞或組織周圍水分,按50μl/cm2滴加FITC反應液(含FITC 2.5μg/mL),室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi),洗兩次,每次5min。 |
PI復染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi),室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上,亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣,置暗盒中,盡早鏡檢觀察。 |
交貨時間 | 15~20天 |
高轉(zhuǎn)移肺癌細胞,95-D細胞傳代:
1.培養(yǎng)皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當?shù)?(能覆蓋細胞就行),消化1-2分鐘。
4.細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細胞,把細胞都懸浮起來。
6.把細胞吸到15ml的離心管中,1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液,加1-2ml培養(yǎng)基,把細胞都吹起來。
高轉(zhuǎn)移肺癌細胞,95-D細胞相關產(chǎn)品如下:hz0099 許旺酵母變種
hz0100 許旺酵母
hz0101 休哈塔假絲酵母
hz0102 胸膜細胞瘤) SMC-1細胞
hz0103 新生牛眼晶體上皮細胞,NBLE細胞
hz0104 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞,NBTF細胞
hz0105 新鞘氨醇單胞菌
hz0106 謝氏丙酸桿菌
hz0107 小細胞肺癌細胞,NCI-H446 [H446]細胞
hz0108 小鼠自發(fā)高乳腺癌細胞,TA2細胞
hz0109 小鼠子宮頸癌細胞,U14細胞
hz0110 小鼠脂肪細胞,L13T3細胞
hz0111 小鼠脂肪細胞,3T3-L1細胞
hz0112 小鼠正常肝細胞,NCTC1469細胞
hz0113 小鼠雜交瘤細胞CD25 PC61細胞
hz0114 小鼠雜交瘤細胞,ST2/o細胞
hz0115 小鼠原成骨細胞,MC3T3-E1 Subclone 14細胞
hz0116 小鼠原B細胞株 BaF3細胞
hz0117 小鼠胰腺腺泡細胞癌細胞,MPC-83細胞
hz0118 小鼠胰腺癌細胞,LTPA細胞
hz0119 小鼠胰島素瘤胰島β細胞,Beta-TC-6細胞,
hz0120 小鼠胰島素瘤β細胞(NOD/Lt轉(zhuǎn)基因小鼠,SV40巨T抗原) NIT-1細胞
hz0121 小鼠胰島素瘤β細胞,NIT-1β細胞,
hz0122 小鼠胰島內(nèi)皮細胞,MS1細胞,
hz0123 小鼠胰島β細胞株 Min6細胞
hz0124 小鼠血細胞,WEHI-3細胞
hz0125 小鼠血管瘤內(nèi)皮細胞,EOMA細胞,
hz0126 小鼠小膠質(zhì)細胞,BV2細胞