檢測原理SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞,COS-7細胞
細胞發(fā)生凋亡或壞死，其細胞DNA均發(fā)生斷裂，細胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細胞DNA斷裂點均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細胞的DNA斷裂點為無特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細胞的死亡，并可與壞死細胞區(qū)別，細胞繁殖以分裂方式進行。細胞作為一個獨立生命單位，既有生長繁殖，也有衰老死亡。細胞衰老是生物有機體衰老的基礎。在多細胞生物的個體發(fā)育過程中，細胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細胞，如肌細胞、紅細胞和神經(jīng)細胞等都屬于高度分化的細胞。當細胞發(fā)生癌變時，細胞便喪失其原來正常的功能，并無休止地分裂，形成腫瘤。
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞,COS-7細胞操作方法
固定 | 培養(yǎng)細胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應液（每50μL反應液含TdT酶0.5μL,標記的-dUTP 1μL），使反應液均勻地覆蓋于所有細胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應 | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時間 | 15~20天 |
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞,COS-7細胞傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當?shù)?(能覆蓋細胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來。
6.把細胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細胞都吹起來。
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞,COS-7細胞相關產(chǎn)品如下：hz0454 人張氏肝細胞,Chang liver細胞,
hz0455 人原位胰腺腺癌細胞,BxPC-3細胞,
hz0456 人原位胰腺腺癌細胞,BxPc-3-EGFP-puro細胞
hz0457 人原髓細胞白血病細胞,HL-60細胞
hz0458 人原髓細胞白血病細胞,AL7P/HL-60R細胞
hz0459 人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞系 293 Ad5+細胞
hz0460 人原巨核細胞型白血病細胞,UT-7細胞
hz0461 人永生化表皮細胞,HaCaT細胞
hz0462 人永生化鼻咽上皮細胞系 NP69細胞,
hz0463 人胰腺腺泡上皮癌 HPAC細胞
hz0464 人胰腺腺癌細胞,Panc 10.05細胞
hz0465 人胰腺細胞,AR42J細胞
hz0466 人胰腺導管腺癌細胞,PL45細胞
hz0467 人胰腺癌細胞系 SW 1990細胞
hz0468 人胰腺癌細胞,SFPAC-1細胞
hz0469 人胰腺癌細胞,PSN1細胞
hz0470 人胰腺癌細胞,PC-3細胞
hz0471 人胰腺癌細胞,PC-2細胞
hz0472 人胰腺癌細胞,Patu 8988細胞
hz0473 人胰腺癌細胞,PANC-1細胞
hz0474 人胰腺癌細胞,Panc 10.05細胞
hz0475 人胰腺癌細胞,MIApaca-2細胞
hz0476 人胰腺癌細胞,KP4細胞
hz0477 人胰腺癌細胞,KP3細胞
hz0478 人胰腺癌細胞,KP2細胞
hz0479 人胰腺癌細胞,KP1細胞
hz0480 人胰腺癌細胞,JF-305細胞
hz0481 人胰腺癌細胞,Human panc28細胞
hz0482 人胰腺癌細胞,Human panc1細胞
