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更新時間:2018-02-02 01:43:08瀏覽次數(shù):190次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)三糖鐵瓊脂(TSI)
是一種能夠自動誘導(dǎo)由乳糖操縱子調(diào)控的目的蛋白質(zhì)表達的培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基有利于大腸桿菌的高水平生長,且無需監(jiān)測細胞生長狀態(tài)、無需加入誘導(dǎo)物(如IPTG)即可高水平自動誘導(dǎo)表達目的蛋白。現(xiàn)貨供應(yīng)。咨詢!
基礎(chǔ)三糖鐵瓊脂(TSI)
絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在*(BSS)基礎(chǔ)上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無機鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2,形成神經(jīng)生物學zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM,現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細胞,同MEM含有相同的營養(yǎng)成分,但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基,應(yīng)仔細了解成分表,應(yīng)知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如,有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有*,而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學領(lǐng)域,但它對某些對*敏感的可能有細胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言,則并非*選擇,特別是如果神經(jīng)元生長在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時。F12中含有*,據(jù)報道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。
三糖鐵瓊脂(TSI)制備方法:
1. 培養(yǎng)同源細胞(未克隆前時的同一細胞)至半?yún)R合狀態(tài)時,更換一次培養(yǎng)液,再繼續(xù)培養(yǎng)24~48小時后,吸出所有培養(yǎng)液。
2. 離心:3000~4000/分離心10分鐘,吸取上清液。
3. 濾過:再經(jīng)直徑0.22μm濾孔的濾膜過濾,低溫凍存貯備用;用時取1分適應(yīng)培養(yǎng)基+2培養(yǎng)基混合使用。
生長因子絕大多數(shù)哺乳類胚胎神經(jīng)元有嚴格的營養(yǎng)要求,若不能提供適宜的生長因子或合適的因子組分,將會使絕大多數(shù)神經(jīng)元在體外培養(yǎng)的數(shù)天中死亡。解決這一問題有兩條思路,一是讓培養(yǎng)細胞提供自己的營養(yǎng)因子,二是在三糖鐵瓊脂(TSI)中加入純的生長因子。如果細胞混合物能在高密度時生長,所需的生長因子便會積累到可觀的數(shù)值,尤其當培養(yǎng)基很少變化時。若某種細胞混合物生長時有很少的營養(yǎng)需求,可保持培養(yǎng)基在一段時間里不作任何變動,以使營養(yǎng)(生長)因子積累,而zui后促使所需要的細胞類型能夠生長。但是,這種對營養(yǎng)(生長)因子自身倚賴性亦有弊端,因為通常在混合細胞群體中細胞很難有同比例增殖,某些細胞會因生長條件的貧乏而受限制。另外,這種方法只能進行相當高密度的細胞培養(yǎng)。因為培養(yǎng)基的條件在細胞的較低密度時變的不夠有效。不過某些時候純化神經(jīng)元群體的低密度培養(yǎng)可用條件培養(yǎng)基(經(jīng)過了高密度培養(yǎng))進行,或在膠質(zhì)上生長的神經(jīng)元所用過的培養(yǎng)基來支持。
滿足神經(jīng)元營養(yǎng)需求的第二條途徑是向培養(yǎng)基中加入生長因子。通常用于組培的通用適宜因子是神經(jīng)生長因子NGF。不過,只有少數(shù)對這種蛋白質(zhì)有反應(yīng)的細胞類型的細胞才能生長。
三糖鐵瓊脂(TSI)相關(guān)產(chǎn)品如下:hz0301 人成巨核細胞白血病細胞 MEG-01
hz0302 人成巨核細胞白血病細胞 Daudi
hz0303 人單核細胞白血病 THP-1
hz0304 人原髓細胞白血病細胞 HL-60
hz0305 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞, NK-92
hz0306 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞, NK-92MI
hz0307 人套細胞淋巴瘤細胞 JeKo-1
hz0308 小鼠X小鼠 PK136
hz0309 小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞 NG108-15 [108CC15]
hz0310 雜交瘤細胞CD25 PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]
hz0311 中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤 MR1 [derivative of HB-11048]
hz0312 雜交瘤細胞抗AChE AE-1
hz0313 雜交瘤細胞抗AChE AE-2
hz0314 雜交瘤細胞抗CD2 OKT 11
hz0315 雜交瘤細胞抗CD2 35.1
hz-1101 DU145(前列腺癌細胞)
hz-1102 Lncap(前列腺癌細胞)
hz-1103 PC-3(前列腺癌細胞)
hz-1104 MOLT-4(急性淋巴母細胞白血病細胞)
hz-1105 5637(膀胱癌細胞)
hz-1106 Raji(Burkitt's 淋巴瘤細胞)
hz-1107 SCaBER(膀胱鱗癌細胞)
hz-1108 NAMALWA(Burkitt's 淋巴瘤細胞)
hz-1109 T24(膀胱移行細胞癌細胞)
hz-1110 HuT78(T淋巴細胞白血病細胞)
hz-1111 SW-13(腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞 )
hz-1112 SW-13(腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞 )
hz-1113 Dami(巨核細胞白血病細胞)
hz-1114 OS-RC-2(腎癌細胞)
hz-1115 MEG-01
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