VRE 瓊脂基礎(chǔ)特殊培養(yǎng)法
二倍體細(xì)胞培養(yǎng)法與一般培養(yǎng)相同，關(guān)鍵在于傳代，其傳代程序?yàn)椋?/span>
1.吸除舊培養(yǎng)液注入另瓶中。
2.用溫BSS沖洗1次。
3.用0.25%溫*消化，加入消化液量以僅覆蓋細(xì)胞層即可；作用1~5分鐘。
4.待細(xì)胞附著松動(dòng)、細(xì)胞質(zhì)邊緣卷起和間隔加大，便終止消化。為防止細(xì)胞丟失,可不必再用BSS沖洗,直接向瓶中加入培養(yǎng)液（新舊培養(yǎng)液按2：1新舊混合）。
5.輕輕反復(fù)吹打制成單個(gè)細(xì)胞懸液。
6.按一分為二比例接種培養(yǎng)。
使用飼細(xì)胞(Feeder Cells)。制備方法：
1.取原代培養(yǎng)的人或動(dòng)物胚胎成纖維細(xì)胞，90%匯合時(shí)制成細(xì)胞懸液，再按105細(xì)胞/毫升重新接種培養(yǎng)。
2.在細(xì)胞半?yún)R合時(shí)，準(zhǔn)備0.25μg/ml的絲裂霉素C，按2μg/106細(xì)胞的量加入到培養(yǎng)瓶中過(guò)夜；或用射線單次照射，劑量30～50戈瑞。
3.細(xì)胞經(jīng)上述處理后，Hanks液漂洗兩次、更換培養(yǎng)液、再培養(yǎng)24小時(shí)，*消化細(xì)胞制成懸液，按5×104（104細(xì)胞/cm2）接種入新VRE 瓊脂基礎(chǔ)中。
4.48小時(shí)后，即可用于細(xì)胞克隆之用。
VRE 瓊脂基礎(chǔ)細(xì)胞分離（克隆）培養(yǎng)
多孔塑料培養(yǎng)板單細(xì)胞克隆法：
1.消化：取健康待克隆細(xì)胞，吸出瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，加消化液。
2.低密度細(xì)胞懸液的制備：做克隆細(xì)胞時(shí)首先需先用消化法制備出分散成單個(gè)細(xì)胞懸液，然后稀釋細(xì)胞，使之成為1~2細(xì)胞/毫升懸液，zui適宜細(xì)胞密度為1~2細(xì)胞/ml培養(yǎng)液。
3.接種：先用吸管輕輕吹打細(xì)胞懸液，使混懸均勻，繼用加樣器向塑料培養(yǎng)板每孔內(nèi)加0.5毫升。接種時(shí)要迅速準(zhǔn)確，爭(zhēng)取在zui短時(shí)間內(nèi)加完，以免培養(yǎng)液蒸發(fā)，然后迅速蓋好蓋板，置CO2溫箱培養(yǎng)。
4.標(biāo)記：培養(yǎng)6~12小時(shí)后，待細(xì)胞下沉冰貼附于培養(yǎng)板孔底后，從溫箱中取出，置倒置光顯微鏡臺(tái)上，觀察和標(biāo)記下含有單個(gè)細(xì)胞的孔，置CO2溫箱培養(yǎng)。在培養(yǎng)中一般無(wú)需換液，只有在細(xì)胞增長(zhǎng)過(guò)于緩慢時(shí)才可進(jìn)行換液。換液時(shí)先吸除舊培養(yǎng)基，但不要吸除過(guò)多，余少許，以免細(xì)胞干涸。然后再迅速補(bǔ)加新鮮克隆培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)3~4周。待孔內(nèi)細(xì)胞增至500~600個(gè)時(shí)，可進(jìn)行分離培養(yǎng)。
5.分離擴(kuò)大培養(yǎng)：培養(yǎng)86~96小時(shí)后進(jìn)行觀察。挑選生長(zhǎng)良好的單細(xì)胞克隆孔，先吸除舊培養(yǎng)液，用Hanks洗1~2次，繼加*少許，加入量已能覆蓋細(xì)胞群即可，如過(guò)多，應(yīng)吸除多余消化液。置于倒置顯微鏡下窺視，待發(fā)現(xiàn)細(xì)胞變圓時(shí)，加入0.1ml含10%血清的克隆培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打，當(dāng)細(xì)胞離開(kāi)底物懸浮后，一并吸入管內(nèi)，移入另瓶或皿中，再補(bǔ)加一定量克隆培養(yǎng)液，置CO2溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)、增殖，使之形成新的細(xì)胞群后，即轉(zhuǎn)用常規(guī)培養(yǎng)法培養(yǎng)。
VRE 瓊脂基礎(chǔ)相關(guān)產(chǎn)品如下：啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基
hz1290 MRS瓊脂 250g 用于啤酒中乳酸菌總數(shù)測(cè)定
hz1291 UBA培養(yǎng)基 250g 用于啤酒中厭氧菌檢測(cè)
hz1292 NBB培養(yǎng)基 250g 用于啤酒中厭氧菌檢測(cè)
hz1293 RaKa-Ray培養(yǎng)基 250g 用于啤酒中乳酸菌檢測(cè)和分離培養(yǎng)
無(wú)菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基
hz1011 溴甲酚紫葡萄糖肉湯 250g 用于低酸性罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢驗(yàn)
hz1005 錳鹽營(yíng)養(yǎng)瓊脂 250g 用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗(yàn)
hz1168 卵黃瓊脂基礎(chǔ) 250g 加入卵黃，用于厭氧梭狀芽孢桿菌的分離培養(yǎng)
hz1019 酸性肉湯培養(yǎng)基 250g 用于酸性缺罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢驗(yàn)
hz1022 麥芽浸膏湯 200g 用于酸性罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢驗(yàn)
hz1215 皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250g 加入牛肉粒，用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(yàn)
hz1216 皰肉牛肉粒 100g 加入皰肉基礎(chǔ)，配成皰肉培養(yǎng)基
hz1298 *肉湯 250g 用于消毒劑效果檢測(cè)
植物細(xì)胞培養(yǎng)基
hz1301 MS培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
hz1302 1/2MS培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)
hz1303 1/4MS培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)
hz1304 B5培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)
hz1305 N6培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)
hz1306 NLN培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)
hz1307 white培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)
hz1308 NS培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)
hz1309 NB培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)
hz1310 RNS培養(yǎng)基 250g 用于植物的組織培養(yǎng)
hz1311 DPD培養(yǎng)基 250g 用于植物組織的培養(yǎng)
hz1312 WPM培養(yǎng)基 250g 用于植物組織的培養(yǎng)
hz1313 MT培養(yǎng)基 250g 用于植物組織的培養(yǎng)
hz1314 C81V培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)
hz1315 改良MS-H培養(yǎng)基 250g 用于植物組織培養(yǎng)
hz1316 knudson C 培養(yǎng)基 250g 用于蘭花組織培養(yǎng)
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基
hz1331 BME 250g 含Earle's鹽和L-*，不含*
hz1332 BME（可高壓滅菌） 250g 含Earle's鹽，不含L-*和*
hz1333 DMEM(低葡萄糖） 250g 含1000mg/L D-葡萄糖、L-*和110mg/L丙酮酸鈉，不含*
hz1334 DMEM(高葡萄糖） 250g 含4500mg/L D-葡萄糖和L-*，不含*
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