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更新時間:2018-02-14 20:52:19瀏覽次數(shù):178次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)Slantz and Bartley 培養(yǎng)基
是一種能夠自動誘導(dǎo)由乳糖操縱子調(diào)控的目的蛋白質(zhì)表達的培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基有利于大腸桿菌的高水平生長,且無需監(jiān)測細胞生長狀態(tài)、無需加入誘導(dǎo)物(如IPTG)即可高水平自動誘導(dǎo)表達目的蛋白。現(xiàn)貨供應(yīng)。咨詢!
Slantz and Bartley 培養(yǎng)基特殊培養(yǎng)法
二倍體細胞培養(yǎng)法與一般培養(yǎng)相同,關(guān)鍵在于傳代,其傳代程序為:
1.吸除舊培養(yǎng)液注入另瓶中。
2.用溫BSS沖洗1次。
3.用0.25%溫*消化,加入消化液量以僅覆蓋細胞層即可;作用1~5分鐘。
4.待細胞附著松動、細胞質(zhì)邊緣卷起和間隔加大,便終止消化。為防止細胞丟失,可不必再用BSS沖洗,直接向瓶中加入培養(yǎng)液(新舊培養(yǎng)液按2:1新舊混合)。
5.輕輕反復(fù)吹打制成單個細胞懸液。
6.按一分為二比例接種培養(yǎng)。
使用飼細胞(Feeder Cells)。制備方法:
1.取原代培養(yǎng)的人或動物胚胎成纖維細胞,90%匯合時制成細胞懸液,再按105細胞/毫升重新接種培養(yǎng)。
2.在細胞半?yún)R合時,準(zhǔn)備0.25μg/ml的絲裂霉素C,按2μg/106細胞的量加入到培養(yǎng)瓶中過夜;或用射線單次照射,劑量30~50戈瑞。
3.細胞經(jīng)上述處理后,Hanks液漂洗兩次、更換培養(yǎng)液、再培養(yǎng)24小時,*消化細胞制成懸液,按5×104(104細胞/cm2)接種入新Slantz and Bartley 培養(yǎng)基中。
4.48小時后,即可用于細胞克隆之用。
Slantz and Bartley 培養(yǎng)基細胞分離(克隆)培養(yǎng)
多孔塑料培養(yǎng)板單細胞克隆法:
1.消化:取健康待克隆細胞,吸出瓶內(nèi)培養(yǎng)液,加消化液。
2.低密度細胞懸液的制備:做克隆細胞時首先需先用消化法制備出分散成單個細胞懸液,然后稀釋細胞,使之成為1~2細胞/毫升懸液,zui適宜細胞密度為1~2細胞/ml培養(yǎng)液。
3.接種:先用吸管輕輕吹打細胞懸液,使混懸均勻,繼用加樣器向塑料培養(yǎng)板每孔內(nèi)加0.5毫升。接種時要迅速準(zhǔn)確,爭取在zui短時間內(nèi)加完,以免培養(yǎng)液蒸發(fā),然后迅速蓋好蓋板,置CO2溫箱培養(yǎng)。
4.標(biāo)記:培養(yǎng)6~12小時后,待細胞下沉冰貼附于培養(yǎng)板孔底后,從溫箱中取出,置倒置光顯微鏡臺上,觀察和標(biāo)記下含有單個細胞的孔,置CO2溫箱培養(yǎng)。在培養(yǎng)中一般無需換液,只有在細胞增長過于緩慢時才可進行換液。換液時先吸除舊培養(yǎng)基,但不要吸除過多,余少許,以免細胞干涸。然后再迅速補加新鮮克隆培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)3~4周。待孔內(nèi)細胞增至500~600個時,可進行分離培養(yǎng)。
5.分離擴大培養(yǎng):培養(yǎng)86~96小時后進行觀察。挑選生長良好的單細胞克隆孔,先吸除舊培養(yǎng)液,用Hanks洗1~2次,繼加*少許,加入量已能覆蓋細胞群即可,如過多,應(yīng)吸除多余消化液。置于倒置顯微鏡下窺視,待發(fā)現(xiàn)細胞變圓時,加入0.1ml含10%血清的克隆培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打,當(dāng)細胞離開底物懸浮后,一并吸入管內(nèi),移入另瓶或皿中,再補加一定量克隆培養(yǎng)液,置CO2溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)、增殖,使之形成新的細胞群后,即轉(zhuǎn)用常規(guī)培養(yǎng)法培養(yǎng)。
Slantz and Bartley 培養(yǎng)基相關(guān)產(chǎn)品如下:hz0004 倉鼠卵巢細胞 CHO
hz0005 倉鼠肺細胞 R 1610
hz0006 倉鼠卵巢細胞,二氫*還原酶缺陷 CHO/dhFr-
hz0007 倉鼠卵巢細胞亞株 CHO-K1
hz0008 倉鼠卵巢細胞 Lec1
hz0009 中國倉鼠卵巢細胞 CTLA4 Ig-24
hz0010 長尾綠猴胚胎細胞 4179
hz0011 長尾綠猴腎細胞 4647
hz0012 大鼠胸大動脈平滑肌細胞 A7r5
hz0013 大鼠成肌細胞 L6
hz0014 大鼠肺泡巨噬細胞 NR8383
hz0015 大鼠心肌細胞 H9c2(2-1)
hz0016 大鼠肝癌細胞 CBRH-7919
hz0017 大鼠肝癌細胞 RH-35
hz0018 大鼠肝細胞 BRL
hz0019 大鼠肝細胞 BRL 3A
hz0020 大鼠胰腺外分泌細胞 AR42J
hz0021 大鼠膠質(zhì)瘤細胞 C6
hz0022 大鼠乳腺癌細胞 SHZ-88
hz0023 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化) PC-12
hz0024 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化) PC-12
hz0025 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化) PC-12
hz0026 大鼠腎細胞 NRK
hz0027 大鼠腎細胞 NRK-52E
hz0028 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞 RBL-2H3
hz0029 大鼠雪旺細胞 RSC96
hz0030 貂肺上皮細胞 Mv.1.Lu
hz0031 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細胞 COS-1
hz0032 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細胞 COS-7
hz0033 非洲綠猴腎細胞 CV-1 [Part of the Wistar Special Collection]
hz0034 非洲綠猴腎細胞 Vero
hz0035 非洲綠猴腎細胞 VERO C1008 (E6)
0.25%溫*消化,加入消化液量以僅覆蓋細胞層即可;作用1~5分鐘。
4.待細胞附著松動、細胞質(zhì)邊緣卷起和間隔加大,便終止消化。為防止細胞丟失,可不必再用BSS沖洗,直接向瓶中加入培養(yǎng)液(新舊培養(yǎng)液按2:1新舊混合)。
5.輕輕反復(fù)吹打制成單個細胞懸液。
6.按一分為二比例接種培養(yǎng)。
使用飼細胞(Feeder Cells)。制備方法:
1.取原代培養(yǎng)的人或動物胚胎成纖維細胞,90%匯合時制成細胞懸液,再按105細胞/毫升重新接種培養(yǎng)。
2.在細胞半?yún)R合時,準(zhǔn)備0.25μg/ml的絲裂霉素C,按2μg/106細胞的量加入到培養(yǎng)瓶中過夜;或用射線單次照射,劑量30~50戈瑞。
3.細胞經(jīng)上述處理后,Hanks液漂洗兩次、更換培養(yǎng)液、再培養(yǎng)24小時,*消化細胞制成懸液,按5×104(104細胞/cm2)接種入新疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)中。
4.48小時后,即可用于細胞克隆之用。
疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)細胞分離(克隆)培養(yǎng)
多孔塑料培養(yǎng)板單細胞克隆法:
1.消化:取健康待克隆細胞,吸出瓶內(nèi)培養(yǎng)液,加消化液。
2.低密度細胞懸液的制備:做克隆細胞時首先需先用消化法制備出分散成單個細胞懸液,然后稀釋細胞,使之成為1~2細胞/毫升懸液,zui適宜細胞密度為1~2細胞/ml培養(yǎng)液。
3.接種:先用吸管輕輕吹打細胞懸液,使混懸均勻,繼用加樣器向塑料培養(yǎng)板每孔內(nèi)加0.5毫升。接種時要迅速準(zhǔn)確,爭取在zui短時間內(nèi)加完,以免培養(yǎng)液蒸發(fā),然后迅速蓋好蓋板,置CO2溫箱培養(yǎng)。
4.標(biāo)記:培養(yǎng)6~12小時后,待細胞下沉冰貼附于培養(yǎng)板孔底后,從溫箱中取出,置倒置光顯微鏡臺上,觀察和標(biāo)記下含有單個細胞的孔,置CO2溫箱培養(yǎng)。在培養(yǎng)中一般無需換液,只有在細胞增長過于緩慢時才可進行換液。換液時先吸除舊培養(yǎng)基,但不要吸除過多,余少許,以免細胞干涸。然后再迅速補加新鮮克隆培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)3~4周。待孔內(nèi)細胞增至500~600個時,可進行分離培養(yǎng)。
5.分離擴大培養(yǎng):培養(yǎng)86~96小時后進行觀察。挑選生長良好的單細胞克隆孔,先吸除舊培養(yǎng)液,用Hanks洗1~2次,繼加*少許,加入量已能覆蓋細胞群即可,如過多,應(yīng)吸除多余消化液。置于倒置顯微鏡下窺視,待發(fā)現(xiàn)細胞變圓時,加入0.1ml含10%血清的克隆培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打,當(dāng)細胞離開底物懸浮后,一并吸入管內(nèi),移入另瓶或皿中,再補加一定量克隆培養(yǎng)液,置CO2溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)、增殖,使之形成新的細胞群后,即轉(zhuǎn)用常規(guī)培養(yǎng)法培養(yǎng)。
疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)相關(guān)產(chǎn)品如下:hz1039 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 250g 用于飲用水,水源水中總大腸菌群的測定
Lactose Peptone Broth
hz1042 亮綠瓊脂 250g 用于飲用水,水源水中沙門氏菌選擇性增菌
Brilliant Green Lactose Broth
hz1043 亮綠乳糖培養(yǎng)基 Brilliant Green Lactose Medium 250g 用于飲用天然礦泉水中大腸桿菌的檢驗(GB標(biāo)準(zhǔn))
hz1083 亞硫酸鉍瓊脂 250g 用于飲用水,水源水中沙門氏菌的選擇性培養(yǎng)
Bismuth Sulfite Agar
hz1044 品紅亞硫酸鈉瓊脂(遠滕氏瓊脂) 250g 用于飲用水、水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證
Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar
hz1410 假單胞分離瓊脂 250g 用于飲用水,水源水中假單胞菌群的測定
Pseudomonas Isolation Agar
hz1401 假單胞分離肉湯 250g 用于飲用水,水源水中假單胞菌群的測定
Pseudomonas IsolationBroth
hz1402 假單胞 F 瓊脂 250g 用于飲用水,水源水中銅綠假單胞菌的測定
Pseudomonas F Agar
hz1403 假單胞 P 瓊脂 250g 用于飲用水,水源水中銅綠假單胞菌的測定
Pseudomonas P Agar
hz1406 MFC培養(yǎng)基 250g 用于飲用水、水源水中糞大腸菌群濾膜法測定(GB標(biāo)準(zhǔn))
MFC Medium
hz1407 氣單胞菌鑒別瓊脂 250g 用于分離培養(yǎng)和鑒別氣單胞菌
Aeromonas Differential Agar
hz1028 橙血清培養(yǎng)基 Orange-serum agar 250g 用于食品及飲料中耐酸菌的檢測
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主營產(chǎn)品:專業(yè)生產(chǎn)ELISA試劑盒,生化試劑,細胞株,分子生物學(xué),生化檢測試劑盒,金標(biāo)檢測試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品 ,抗體,等產(chǎn)品 .
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