NS 培養(yǎng)基特殊培養(yǎng)法
二倍體細(xì)胞培養(yǎng)法與一般培養(yǎng)相同，關(guān)鍵在于傳代，其傳代程序?yàn)椋?/span>
1.吸除舊培養(yǎng)液注入另瓶中。
2.用溫BSS沖洗1次。
3.用0.25%溫*消化，加入消化液量以僅覆蓋細(xì)胞層即可；作用1~5分鐘。
4.待細(xì)胞附著松動(dòng)、細(xì)胞質(zhì)邊緣卷起和間隔加大，便終止消化。為防止細(xì)胞丟失,可不必再用BSS沖洗,直接向瓶中加入培養(yǎng)液（新舊培養(yǎng)液按2：1新舊混合）。
5.輕輕反復(fù)吹打制成單個(gè)細(xì)胞懸液。
6.按一分為二比例接種培養(yǎng)。
使用飼細(xì)胞(Feeder Cells)。制備方法：
1.取原代培養(yǎng)的人或動(dòng)物胚胎成纖維細(xì)胞，90%匯合時(shí)制成細(xì)胞懸液，再按105細(xì)胞/毫升重新接種培養(yǎng)。
2.在細(xì)胞半?yún)R合時(shí)，準(zhǔn)備0.25μg/ml的絲裂霉素C，按2μg/106細(xì)胞的量加入到培養(yǎng)瓶中過夜；或用射線單次照射，劑量30～50戈瑞。
3.細(xì)胞經(jīng)上述處理后，Hanks液漂洗兩次、更換培養(yǎng)液、再培養(yǎng)24小時(shí)，*消化細(xì)胞制成懸液，按5×104（104細(xì)胞/cm2）接種入新NS 培養(yǎng)基中。
4.48小時(shí)后，即可用于細(xì)胞克隆之用。
NS 培養(yǎng)基細(xì)胞分離（克隆）培養(yǎng)
多孔塑料培養(yǎng)板單細(xì)胞克隆法：
1.消化：取健康待克隆細(xì)胞，吸出瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，加消化液。
2.低密度細(xì)胞懸液的制備：做克隆細(xì)胞時(shí)首先需先用消化法制備出分散成單個(gè)細(xì)胞懸液，然后稀釋細(xì)胞，使之成為1~2細(xì)胞/毫升懸液，zui適宜細(xì)胞密度為1~2細(xì)胞/ml培養(yǎng)液。
3.接種：先用吸管輕輕吹打細(xì)胞懸液，使混懸均勻，繼用加樣器向塑料培養(yǎng)板每孔內(nèi)加0.5毫升。接種時(shí)要迅速準(zhǔn)確，爭(zhēng)取在zui短時(shí)間內(nèi)加完，以免培養(yǎng)液蒸發(fā)，然后迅速蓋好蓋板，置CO2溫箱培養(yǎng)。
4.標(biāo)記：培養(yǎng)6~12小時(shí)后，待細(xì)胞下沉冰貼附于培養(yǎng)板孔底后，從溫箱中取出，置倒置光顯微鏡臺(tái)上，觀察和標(biāo)記下含有單個(gè)細(xì)胞的孔，置CO2溫箱培養(yǎng)。在培養(yǎng)中一般無需換液，只有在細(xì)胞增長(zhǎng)過于緩慢時(shí)才可進(jìn)行換液。換液時(shí)先吸除舊培養(yǎng)基，但不要吸除過多，余少許，以免細(xì)胞干涸。然后再迅速補(bǔ)加新鮮克隆培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)3~4周。待孔內(nèi)細(xì)胞增至500~600個(gè)時(shí)，可進(jìn)行分離培養(yǎng)。
5.分離擴(kuò)大培養(yǎng)：培養(yǎng)86~96小時(shí)后進(jìn)行觀察。挑選生長(zhǎng)良好的單細(xì)胞克隆孔，先吸除舊培養(yǎng)液，用Hanks洗1~2次，繼加*少許，加入量已能覆蓋細(xì)胞群即可，如過多，應(yīng)吸除多余消化液。置于倒置顯微鏡下窺視，待發(fā)現(xiàn)細(xì)胞變圓時(shí)，加入0.1ml含10%血清的克隆培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打，當(dāng)細(xì)胞離開底物懸浮后，一并吸入管內(nèi)，移入另瓶或皿中，再補(bǔ)加一定量克隆培養(yǎng)液，置CO2溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)、增殖，使之形成新的細(xì)胞群后，即轉(zhuǎn)用常規(guī)培養(yǎng)法培養(yǎng)。
NS 培養(yǎng)基相關(guān)產(chǎn)品如下：hz1053 麥康凱瓊脂NO3 250g 用于革蘭氏陰性腸道桿菌的分離
MacConkey Agar NO3
hz1054 *麥康凱瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于大腸桿菌O157的分離培養(yǎng)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
hz1055 Sorbitol Maconkey Agar Base
hz1057 Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ) 250g 用于致瀉大腸埃希氏菌的產(chǎn)毒培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
Honda Toxin-Producing Broth Base
hz1058 Elek氏培養(yǎng)基 250g 用于致瀉大腸埃希氏菌的毒素測(cè)定（GB標(biāo)準(zhǔn)）
Elek Medium
hz1059 緩沖MUG瓊脂 100g 用于濾膜/MUG法檢測(cè)食品中大腸桿菌數(shù)（SN/T1059.2）
Buffer MUG Agar
hz1060 緩沖MUG肉湯 100g 用于濾膜/MUG法檢測(cè)食品中大腸桿菌數(shù)（SN/T1059.2）
Buffer MUG Broth
hz1061 Koser氏枸櫞酸鹽肉湯 100g 用于大腸埃希氏菌檢測(cè)
Koser Citrate Medium
hz1062 Columbia-MUG瓊脂培養(yǎng)基 100g 用于熒光法大腸桿菌的測(cè)定（SN）
Columbia-MUG Agar
hz1014 胰蛋白胨大豆瓊脂 250g 用于坂崎腸桿菌色素生成試驗(yàn)（FDA方法）；也可用于一般細(xì)菌的培養(yǎng)、轉(zhuǎn)種、復(fù)壯等
Trypticase (Tryptic) Soy Agar
hz1064 改良胰蛋白胨大豆肉湯（mTSB） 250g 用于食品和動(dòng)物飼料中大腸桿菌O157的增菌培養(yǎng)（SN，ISO標(biāo)準(zhǔn)）
Tryptic Soy Agar Modified
hz1065 TB培養(yǎng)基 250g 用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)，營(yíng)養(yǎng)豐富
Terrific Broth
hz1066 SB培養(yǎng)基 250g 用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)，營(yíng)養(yǎng)非常豐富
Super Broth
hz1067 SOB培養(yǎng)基 250g 用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)
SOB Medium
hz1068 SOC培養(yǎng)基 250g 用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)
SOC Medium
hz1069 茜素-半乳糖苷瓊脂 100g 用于食品飲料及飲用水中的大腸菌群快速檢驗(yàn)與計(jì)數(shù)
Aliz-gal Agar
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