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上海滬震實業有限公司


H 培養基

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更新時間:2018-02-05 17:40:36瀏覽次數:279次

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產品簡介

H 培養基
是一種能夠自動誘導由乳糖操縱子調控的目的蛋白質表達的培養基。該培養基有利于大腸桿菌的高水平生長,且無需監測細胞生長狀態、無需加入誘導物(如IPTG)即可高水平自動誘導表達目的蛋白。現貨供應。咨詢!

詳細介紹

H 培養基特殊培養法

二倍體細胞培養法與一般培養相同,關鍵在于傳代,其傳代程序為:

1.吸除舊培養液注入另瓶中。

2.用溫BSS沖洗1次。

3.0.25%溫*消化,加入消化液量以僅覆蓋細胞層即可;作用1~5分鐘。

4.待細胞附著松動、細胞質邊緣卷起和間隔加大,便終止消化。為防止細胞丟失,可不必再用BSS沖洗,直接向瓶中加入培養液(新舊培養液按21新舊混合)。

5.輕輕反復吹打制成單個細胞懸液。

6.按一分為二比例接種培養。

使用飼細胞(Feeder Cells)。制備方法:

1.取原代培養的人或動物胚胎成纖維細胞,90%匯合時制成細胞懸液,再按105細胞/毫升重新接種培養。

2.在細胞半匯合時,準備0.25μg/ml的絲裂霉素C,按2μg/106細胞的量加入到培養瓶中過夜;或用射線單次照射,劑量3050戈瑞。

3.細胞經上述處理后,Hanks液漂洗兩次、更換培養液、再培養24小時,*消化細胞制成懸液,按5×104104細胞/cm2)接種入新H 培養基中。

4.48小時后,即可用于細胞克隆之用。

H 培養基細胞分離(克隆)培養

多孔塑料培養板單細胞克隆法:

1.消化:取健康待克隆細胞,吸出瓶內培養液,加消化液。

2.低密度細胞懸液的制備:做克隆細胞時首先需先用消化法制備出分散成單個細胞懸液,然后稀釋細胞,使之成為1~2細胞/毫升懸液,zui適宜細胞密度為1~2細胞/ml培養液。

3.接種:先用吸管輕輕吹打細胞懸液,使混懸均勻,繼用加樣器向塑料培養板每孔內加0.5毫升。接種時要迅速準確,爭取在zui短時間內加完,以免培養液蒸發,然后迅速蓋好蓋板,置CO2溫箱培養。

4.標記:培養6~12小時后,待細胞下沉冰貼附于培養板孔底后,從溫箱中取出,置倒置光顯微鏡臺上,觀察和標記下含有單個細胞的孔,置CO2溫箱培養。在培養中一般無需換液,只有在細胞增長過于緩慢時才可進行換液。換液時先吸除舊培養基,但不要吸除過多,余少許,以免細胞干涸。然后再迅速補加新鮮克隆培養液,繼續培養3~4周。待孔內細胞增至500~600個時,可進行分離培養。

5.分離擴大培養:培養86~96小時后進行觀察。挑選生長良好的單細胞克隆孔,先吸除舊培養液,用Hanks1~2次,繼加*少許,加入量已能覆蓋細胞群即可,如過多,應吸除多余消化液。置于倒置顯微鏡下窺視,待發現細胞變圓時,加入0.1ml10%血清的克隆培養基,用吸管輕輕吹打,當細胞離開底物懸浮后,一并吸入管內,移入另瓶或皿中,再補加一定量克隆培養液,置CO2溫箱中繼續培養、增殖,使之形成新的細胞群后,即轉用常規培養法培養。

H 培養基相關產品如下:hz1072    Baird-Parker瓊脂基礎    250g    用于*的選擇性分離培養(GB,SN,FDA標準)
    Baird-Parker Agar Base        
hz1073    改良Giolitti-Cantoni肉湯    250g    用于*的增菌培養(ISO標準)
    Giolitti-Cantoni Broth        
hz1074    7.5%氯化鈉肉湯    250g    用于*的增菌培養(GB標準)
    7.5% Sodium Chloride Broth        
hz1007    營養肉湯培養基    250g    用于*的增菌培養(SN標準)
    Broth Medium        
hz1111    亞碲酸鈉肉湯培養基基礎    250g    用于*增菌培養,每100ml 培養基需另加入1%亞碲酸鈉1ml
    Yolk lurite Broth Base        
hz1112    葡萄球菌增菌肉湯    250g    用于凝固酶陽性葡萄球菌的選擇性增菌
    Staphylococcus Enrichment Broth        
hz1113    葡萄球菌選擇性瓊脂    250g    用于凝固酶陽性葡萄球菌的選擇性分離培養
    Staphylococcus Selective Aga        
hz1114    卵黃*高鹽瓊脂基礎    250g    用于食品中*的選擇性分離培養
    Egg-Manitol Salt Agar        
hz1115    血液瓊脂基礎    250g    供分離營養要求較高的致病菌用,后加血液制成血平板
    Blood Agar Base        
hz1020    腦心浸出液肉湯    250g    用于營養要求較高的微生物的培養
    Brain Heaet Infusion Broth        
hz1021    哥倫比亞瓊脂    250g    用于營養要求較高的微生物的培養及溶血試驗
    Columbia Agar Base        
hz1118    *氯化鈉瓊脂    250g    用于*選擇性分離培養
    Mannitol Salt Agar        
hz1119    *發酵培養基    250g    用于鑒別*發酵試驗
    Mannitol Ferment Medium        
hz1120    甲苯胺藍-DNA瓊脂    250g    用于*核酸酶試驗
    Toluidine Blue -DNA Agar        
酵母、霉菌檢測培養基            
hz1121    察氏瓊脂    250g    用于青霉,曲霉鑒定及保存菌種用(GB標準)
    Czapek Dox Agar        
hz1122    高鹽察氏瓊脂    250g    用于霉菌和酵母菌的計數(GB標準)
    Salt Czapek Dox Agar        
hz1123    馬鈴薯葡萄糖瓊脂    250g    用于霉菌,酵母菌計數(GB標準)
     Potato Dextrose Agar(PDA)        
hz1124    沙氏瓊脂培養基    250g    用于真菌檢測(GB標準)
    Sabourauds Agar        
hz1125    沙氏液體培養基    250g    用于真菌、酵母菌增菌
    Liquid Sabouraud Medium        
hz1126    產毒培養基    250g    用于青霉,曲霉的產毒培養
    Toxin-Producing Medium        
hz1127    玉米粉瓊脂    250g    用于真菌培養


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