表皮葡萄球菌特殊培養(yǎng)法
二倍體細胞培養(yǎng)法與一般培養(yǎng)相同，關(guān)鍵在于傳代，其傳代程序為：
1.吸除舊培養(yǎng)液注入另瓶中。
2.用溫BSS沖洗1次。
3.用0.25%溫*消化，加入消化液量以僅覆蓋細胞層即可；作用1~5分鐘。
4.待細胞附著松動、細胞質(zhì)邊緣卷起和間隔加大，便終止消化。為防止細胞丟失,可不必再用BSS沖洗,直接向瓶中加入培養(yǎng)液（新舊培養(yǎng)液按2：1新舊混合）。
5.輕輕反復吹打制成單個細胞懸液。
6.按一分為二比例接種培養(yǎng)。
使用飼細胞(Feeder Cells)。制備方法：
1.取原代培養(yǎng)的人或動物胚胎成纖維細胞，90%匯合時制成細胞懸液，再按105細胞/毫升重新接種培養(yǎng)。
2.在細胞半?yún)R合時，準備0.25μg/ml的絲裂霉素C，按2μg/106細胞的量加入到培養(yǎng)瓶中過夜；或用射線單次照射，劑量30～50戈瑞。
3.細胞經(jīng)上述處理后，Hanks液漂洗兩次、更換培養(yǎng)液、再培養(yǎng)24小時，*消化細胞制成懸液，按5×104（104細胞/cm2）接種入新表皮葡萄球菌中。
4.48小時后，即可用于細胞克隆之用。
細胞分離（克隆）培養(yǎng)
多孔塑料培養(yǎng)板單細胞克隆法：
1.消化：取健康待克隆細胞，吸出瓶內(nèi)培養(yǎng)液，加消化液。
2.低密度細胞懸液的制備：做克隆細胞時首先需先用消化法制備出分散成單個細胞懸液，然后稀釋細胞，使之成為1~2細胞/毫升懸液，zui適宜細胞密度為1~2細胞/ml培養(yǎng)液。
3.接種：先用吸管輕輕吹打細胞懸液，使混懸均勻，繼用加樣器向塑料培養(yǎng)板每孔內(nèi)加0.5毫升。接種時要迅速準確，爭取在zui短時間內(nèi)加完，以免培養(yǎng)液蒸發(fā)，然后迅速蓋好蓋板，置CO2溫箱培養(yǎng)。
4.標記：培養(yǎng)6~12小時后，待細胞下沉冰貼附于培養(yǎng)板孔底后，從溫箱中取出，置倒置光顯微鏡臺上，觀察和標記下含有單個細胞的孔，置CO2溫箱培養(yǎng)。在培養(yǎng)中一般無需換液，只有在細胞增長過于緩慢時才可進行換液。換液時先吸除舊培養(yǎng)基，但不要吸除過多，余少許，以免細胞干涸。然后再迅速補加新鮮克隆培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)3~4周。待孔內(nèi)細胞增至500~600個時，可進行分離培養(yǎng)。
5.分離擴大培養(yǎng)：培養(yǎng)86~96小時后進行觀察。挑選生長良好的單細胞克隆孔，先吸除舊培養(yǎng)液，用Hanks洗1~2次，繼加*少許，加入量已能覆蓋細胞群即可，如過多，應吸除多余消化液。置于倒置顯微鏡下窺視，待發(fā)現(xiàn)細胞變圓時，加入0.1ml含10%血清的克隆培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打，當細胞離開底物懸浮后，一并吸入管內(nèi)，移入另瓶或皿中，再補加一定量克隆培養(yǎng)液，置CO2溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)、增殖，使之形成新的細胞群后，即轉(zhuǎn)用常規(guī)培養(yǎng)法培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz0723 人臍靜脈血管內(nèi)皮原代細胞,HUVEC細胞,
hz0724 人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞,HUVEC細胞
hz0725 人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞,HUVEC（原代）細胞
hz0726 人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞,human HUVEC細胞
hz0727 人臍靜脈細胞融合細胞,EA.hy926細胞,
hz0728 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,HUV-EC細胞
hz0729 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,HUVEC細胞
hz0730 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,HUVE-12/CRL2480細胞
hz0731 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,ECV304細胞,
hz0732 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,ECV304細胞
hz0733 人臍靜脈內(nèi)皮 (具有T24細胞特性) ECV-304細胞
hz0734 人葡萄膜黑色素細胞,UM細胞
hz0735 人皮膚纖維微細胞系 Malmc細胞
hz0736 人皮膚鱗癌細胞,A431細胞
hz0737 人皮膚黑色素瘤細胞,SK-MEL-1細胞
hz0738 人皮膚成纖維細胞系 BJ細胞
hz0739 人皮膚成纖維細胞,HSF細胞
hz0740 人皮膚成纖維細胞,Hs 865.Sk細胞
hz0741 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
hz0742 人皮膚癌細胞系 HS-4細胞
hz0743 人皮膚癌細胞系 HS-1細胞
hz0744 人皮膚T細胞淋巴瘤 Hut102細胞
hz0745 人胚纖維細胞系 HEF細胞
hz0746 人胚胎胰腺組織來源細胞,CCC-HPE-2細胞
hz0747 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞,HFSF細胞
hz0748 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞,HFTF細胞
hz0749 人胚胎腸粘膜細胞,CCC-HIE-2細胞
hz0750 人胚腎細胞--用于慢病毒包裝 293LVT細胞
hz0751 人胚腎細胞（亞系克隆）FIP293細胞
hz0752 人胚腎細胞,AD293細胞
hz0753 人胚腎細胞,AAV-293細胞
