牛肝浸粉（優(yōu)質(zhì)）特殊培養(yǎng)法
二倍體細胞培養(yǎng)法與一般培養(yǎng)相同，關(guān)鍵在于傳代，其傳代程序為：
1.吸除舊培養(yǎng)液注入另瓶中。
2.用溫BSS沖洗1次。
3.用0.25%溫*消化，加入消化液量以僅覆蓋細胞層即可；作用1~5分鐘。
4.待細胞附著松動、細胞質(zhì)邊緣卷起和間隔加大，便終止消化。為防止細胞丟失,可不必再用BSS沖洗,直接向瓶中加入培養(yǎng)液（新舊培養(yǎng)液按2：1新舊混合）。
5.輕輕反復(fù)吹打制成單個細胞懸液。
6.按一分為二比例接種培養(yǎng)。
使用飼細胞(Feeder Cells)。制備方法：
1.取原代培養(yǎng)的人或動物胚胎成纖維細胞，90%匯合時制成細胞懸液，再按105細胞/毫升重新接種培養(yǎng)。
2.在細胞半?yún)R合時，準備0.25μg/ml的絲裂霉素C，按2μg/106細胞的量加入到培養(yǎng)瓶中過夜；或用射線單次照射，劑量30～50戈瑞。
3.細胞經(jīng)上述處理后，Hanks液漂洗兩次、更換培養(yǎng)液、再培養(yǎng)24小時，*消化細胞制成懸液，按5×104（104細胞/cm2）接種入新牛肝浸粉（優(yōu)質(zhì)）中。
4.48小時后，即可用于細胞克隆之用。
細胞分離（克?。┡囵B(yǎng)
多孔塑料培養(yǎng)板單細胞克隆法：
1.消化：取健康待克隆細胞，吸出瓶內(nèi)培養(yǎng)液，加消化液。
2.低密度細胞懸液的制備：做克隆細胞時首先需先用消化法制備出分散成單個細胞懸液，然后稀釋細胞，使之成為1~2細胞/毫升懸液，zui適宜細胞密度為1~2細胞/ml培養(yǎng)液。
3.接種：先用吸管輕輕吹打細胞懸液，使混懸均勻，繼用加樣器向塑料培養(yǎng)板每孔內(nèi)加0.5毫升。接種時要迅速準確，爭取在zui短時間內(nèi)加完，以免培養(yǎng)液蒸發(fā)，然后迅速蓋好蓋板，置CO2溫箱培養(yǎng)。
4.標記：培養(yǎng)6~12小時后，待細胞下沉冰貼附于培養(yǎng)板孔底后，從溫箱中取出，置倒置光顯微鏡臺上，觀察和標記下含有單個細胞的孔，置CO2溫箱培養(yǎng)。在培養(yǎng)中一般無需換液，只有在細胞增長過于緩慢時才可進行換液。換液時先吸除舊培養(yǎng)基，但不要吸除過多，余少許，以免細胞干涸。然后再迅速補加新鮮克隆培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)3~4周。待孔內(nèi)細胞增至500~600個時，可進行分離培養(yǎng)。
5.分離擴大培養(yǎng)：培養(yǎng)86~96小時后進行觀察。挑選生長良好的單細胞克隆孔，先吸除舊培養(yǎng)液，用Hanks洗1~2次，繼加*少許，加入量已能覆蓋細胞群即可，如過多，應(yīng)吸除多余消化液。置于倒置顯微鏡下窺視，待發(fā)現(xiàn)細胞變圓時，加入0.1ml含10%血清的克隆培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打，當細胞離開底物懸浮后，一并吸入管內(nèi)，移入另瓶或皿中，再補加一定量克隆培養(yǎng)液，置CO2溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)、增殖，使之形成新的細胞群后，即轉(zhuǎn)用常規(guī)培養(yǎng)法培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz1190 人膀胱癌細胞,HT-1376細胞
hz1191 人膀胱癌細胞,EJ細胞
hz1192 人膀胱癌細胞,BIU-87細胞
hz1193 人膀胱癌細胞,5637細胞,
hz1194 人膀胱癌細胞,5637（HTB-9）細胞
hz1195 人瘢痕疙瘩成纖維細胞,HKF細胞,
hz1196 人白血病細胞,U937細胞
hz1197 人白血病細胞,SK細胞
hz1198 人白血病細胞,KG-1細胞
hz1199 人白血病細胞,HL-60細胞
hz1200 人白血病細胞,Daudi細胞
hz1201 人白血病*耐藥株 K562/Adr細胞
hz1202 人白血病*耐藥株 HL-60/Ad細胞
hz1203 人XG惡性膠質(zhì)瘤細胞,SF-295細胞
hz1204 人T細胞淋巴瘤 Hurt-78細胞
hz1205 人T細胞淋巴瘤 Hat-78細胞
hz1206 人T細胞白血病細胞,T-CEM細胞
hz1207 人T細胞白血病細胞,HuT 78細胞
hz1208 人T細胞白血病細胞,A3細胞
hz1209 人T細胞白血病細胞,6T-CEM細胞,
hz1210 人T淋巴細胞系 H9細胞
hz1211 人T淋巴細胞白血病細胞,Jurkat, Clone E6-1細胞
hz1212 人T淋巴細胞白血病細胞,Hut78細胞
hz1213 人T淋巴細胞白血病細胞,A3細胞
hz1214 人T淋巴細胞白血病,CD8+ Molt-4細胞
hz1215 人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細胞,Jurkat D,E細胞
hz1216 人T淋巴瘤細胞系 Hut-102細胞
hz1217 人T淋巴瘤細胞Jurkat亞系 Jurkat77細胞
hz1218 人SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞,hFOB 1.19細胞
hz1219 人SV－40轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞, WI－38AV13細胞
hz1220 人Ph+急淋白血病細胞系 SUP-B15細胞,
