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高免血清“抗血清”制備和使用簡易方法

閱讀:364發布時間:2015-2-9

以下文章給大家介紹高免血清“抗血清"制備和使用簡易方法。

一、制備高免血清,對母豬的選擇

制備高免血清應選用近期有過典型臨床表現且明顯康復母豬:體質健壯,無特殊病原體感染,產仔6胎以上,年老、繁殖力下降,無種用價值的淘汰母豬。因豬場發病一般從母豬開始,而康復速度也以母豬zui快,因此往往能用康復母豬的血清保護到大部分保育豬。

二、制備高免血清程序

1.采血

采血應在上午空腹時進行,禁食一夜,可避免血中出現乳糜而獲得澄清的血清。將所選擇母豬沖洗干凈固定 于“X"型的保定架上,仰臥保定,將豬尾一端墊高,左胸前口剃毛并用碘酒清洗,用酒精脫碘,等酒精揮發后,準備一空心銅管,一端尖、一端平,長40cm、 直徑約1cm,消毒、烘干后平的一端套硅橡膠管,經消毒的胸前口捅入豬的心臟(不要刺太深防止*穿透心臟),放血。

2.接血

消毒烘干好的容器(大離心瓶或500ml的注射用生理鹽水瓶),將膠管的一頭貼住瓶壁,血順瓶壁留下,裝約400-500ml(離心瓶依照儀器要求)。

3.取血清

離心法:400×4離心機按一般血液離心要求進行即可;自然析出:封好瓶口,冷卻到室溫,放入4度冰箱過夜,異日取出,取血清,另外裝瓶、封口。

4.滅活

56度溫箱中1.5小時(保證全瓶血清維持在56度時間至少1小時),自然冷卻,加入抗生素(一般是雙抗,具體劑量還要看各廠的實際情況),有條件可以對血清進行鈷-60輻照消毒。將血清冷凍保存(隨解凍隨用,大約可以保存12周)。

5.血清的無菌檢查

血清通過接種瓊脂平板,溫箱培養看是否有菌落生長,另外(雙抗的量加多少可以通過培養情況來確定)

6.安全性實驗

通過培養無細菌生長的血清注射小豬約10頭(5日齡-10日齡)(腹腔注射),觀察一周(每日量體溫,觀察是否發病)如發病務必確診發病原因。

7.使用方法

肌肉注射:小豬2ml, 中大豬3-5ml, 母豬8ml。隔5日再注射一次。


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