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T4 DNA連接酶

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海

聯(lián)系方式:馬經(jīng)理查看聯(lián)系方式

更新時間:2015-03-25 10:48:23瀏覽次數(shù):363次

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經(jīng)營模式:經(jīng)銷商

商鋪產(chǎn)品:9811條

所在地區(qū):上海上海

聯(lián)系人:馬經(jīng)理 (銷售專員)

產(chǎn)品簡介

DNA連接酶(DNA Ligase)也稱DNA黏合酶,在分子生物學(xué)中扮演一個既特殊又關(guān)鍵的角色,那就是連接DNA鏈3‘-OH末端和,另一DNA鏈的5’-P末端,使二者生成磷酸二酯鍵,從而把兩段相鄰的DNA鏈連成完整的鏈。連接酶的催化作用需要消耗ATP。

詳細(xì)介紹

[產(chǎn)品名稱]T4 DNA連接酶
[包裝]1KU
[到貨期]2-3天

英文名稱:T4 DNA Ligase 

分子量:55.3kDa,單體

級別:BR
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌

活性定義:是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37℃30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1weiss單位相當(dāng)于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)5-DNA末端)中,在16℃30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量) 
抑制劑:當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1KC1的濃度超過200 mM時,可強烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:T4 DNA LigaseDNA結(jié)合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉(zhuǎn)化時,連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%;電轉(zhuǎn)化之前,先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制:測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測:粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀(以下信息僅供參考):液體。該酶催化雙鏈DNARNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復(fù)雙鏈DNARNADNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNARNADNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù);連接酶介導(dǎo)的RNA檢測;位點特異性突變;擴增片段長度多態(tài)性
保存: -20°C


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