血管性血友病因子裂解蛋白酶ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
本試劑僅供研究使用 標(biāo)本：體液
血管性血友病因子裂解蛋白酶ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)試驗(yàn)原理：
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA 檢測(cè)試劑盒洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。
血管性血友病因子裂解蛋白酶ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)自備材料
1．蒸餾水。
2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2．實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項(xiàng)
1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6．洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9．按照中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。
2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。
操作步驟
1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2．根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9．在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。
性能
1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
結(jié)果判斷與分析
1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測(cè)值范圍：0-800pg/ml
4、敏感度： 1.0 pg/ml
visfatin 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 規(guī)格： 48T/96T
vaspin 人內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑 規(guī)格： 48T/96T
EL 人內(nèi)皮脂肪酶 規(guī)格： 48T/96T
ES 人內(nèi)皮抑素 規(guī)格： 48T/96T
eNOS-3 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 規(guī)格： 48T/96T
eNOS 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶 規(guī)格： 48T/96T
ET-1 人內(nèi)皮素1 規(guī)格： 48T/96T
ET-1 人內(nèi)皮素1 規(guī)格： 48T/96T
EG-VEGF 人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 規(guī)格： 48T/96T
ET 人內(nèi)毒素 規(guī)格： 48T/96T
TdT 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格： 48T/96T
TCC C5b-9 人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9 規(guī)格： 48T/96T
ponticulin 人膜橋蛋白 規(guī)格： 48T/96T
ANX-Ⅴ 人膜聯(lián)蛋白Ⅴ 規(guī)格： 48T/96T
MAC 人膜攻擊復(fù)合物 規(guī)格： 48T/96T
MCP/CD46 人膜輔蛋白 規(guī)格： 48T/96T
MIS/AMH 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素 規(guī)格： 48T/96T
IAP 人免疫抑制酸性蛋白 規(guī)格： 48T/96T
IgHV *重鏈可變區(qū) 規(guī)格： 48T/96T
IgH *重鏈 規(guī)格： 48T/96T
ILTsR/LIR/CD85 *樣轉(zhuǎn)錄體受體 規(guī)格： 48T/96T
λ-IgLC *輕鏈lambda 規(guī)格： 48T/96T
κ-IgLC *輕鏈kappa抗體 規(guī)格： 48T/96T
IgM *M 規(guī)格： 48T/96T
Ig-j *j鏈 規(guī)格： 48T/96T
IgG *G 規(guī)格： 48T/96T
Fcγ *G Fc片段 規(guī)格： 48T/96T
FcγRⅢ/CD16 *G Fc段受體Ⅲ 規(guī)格： 48T/96T
FcγRⅡ/CD32 *G Fc段受體Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T
FcγRⅠ/CD64 *G Fc段受體Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T
IgE *E 規(guī)格： 48T/96T
FcεRⅡ/CD23 *E Fc段受體Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T
FcεRⅠ *E Fc段受體Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T
IgA *A 規(guī)格： 48T/96T
FcαRⅠ/CD89 *A Fc段受體Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T
Irna 人免疫核糖核酸 規(guī)格： 48T/96T
irGH 人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素 規(guī)格： 48T/96T
PWM 人美洲商陸素 規(guī)格： 48T/96T
CED-3 人美麗線蟲(chóng)凋亡基因 規(guī)格： 48T/96T
ankyrin 人錨蛋白 規(guī)格： 48T/96T
ATM 人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因 規(guī)格： 48T/96T
Gliadin-IgA 人麥角蛋白IgA 規(guī)格： 48T/96T
MV IgM 人麻疹病毒IgM 規(guī)格： 48T/96T
MV IgG 人麻疹病毒IgG 規(guī)格： 48T/96T
MV 人麻疹病毒 規(guī)格： 48T/96T
PF 人落葉型天皰瘡抗體 規(guī)格： 48T/96T
Helical Peptide 人螺旋肽 規(guī)格： 48T/96T
RV Ag 人輪狀病毒抗原 規(guī)格： 48T/96T
OVA sIgG 人卵清蛋白特異性IgG 規(guī)格： 48T/96T
OVA sIgE 人卵清蛋白特異性IgE 規(guī)格： 48T/96T
人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit，48T/96T 人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
PEA 人綠膿桿菌外毒素A 規(guī)格： 48T/96T
TrxR 人硫氧還蛋白還原酶 規(guī)格： 48T/96T
Trx 人硫氧化還原蛋白 規(guī)格： 48T/96T
MS 人硫酸褪黑色素 規(guī)格： 48T/96T
KS 人硫酸角質(zhì)素 規(guī)格： 48T/96T
HSPG 人硫酸肝素糖蛋白 規(guī)格： 48T/96T
JE IgG 人流行性乙型腦炎抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T
EP 人流行性腮腺炎 規(guī)格： 48T/96T
FLU 人流感病毒抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T
FLU A 人流感病毒A 規(guī)格： 48T/96T
SCCAg 人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原 規(guī)格： 48T/96T
SCCAg-2 人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2 規(guī)格： 48T/96T
PIPLC 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C 規(guī)格： 48T/96T
PLCγ1 人磷酯酶Cγ鏈 規(guī)格： 48T/96T
PLC 人磷酯酶C 規(guī)格： 48T/96T
PI Ab-IgG/IgM 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規(guī)格： 48T/96T
GPC-3 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 規(guī)格： 48T/96T
PL-A2 人磷脂酶A2 規(guī)格： 48T/96T
PCK 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 規(guī)格： 48T/96T
PGM 人磷酸葡萄糖變位酶 規(guī)格： 48T/96T
PI3K 人磷酸肌醇3激酶 規(guī)格： 48T/96T
PaCoA 人磷酸化乙酰* 規(guī)格： 48T/96T
pERK 人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 規(guī)格： 48T/96T
P-PKC 人磷酸化蛋白激酶C 規(guī)格： 48T/96T
PGAM2 人磷酸甘油酸變位酶2 規(guī)格： 48T/96T
人淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 人淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
Lptn/LTN/XCL1 人淋巴細(xì)胞趨化因子 規(guī)格： 48T/96T
LFA-3/CD58 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 規(guī)格： 48T/96T
LFA-2/CD2 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2 規(guī)格： 48T/96T
LFA-1/CD11a+CD18 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原1 規(guī)格： 48T/96T
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