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上海撫生實業有限公司
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閱讀:170發布時間:2019-07-17
上海撫生介紹細胞操作原理
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1、細胞上清(分泌性蛋白)
1.貼壁細胞或半貼壁,直接將細胞培養上清吸出,10000rmpx10min,取上清,-20℃或4℃保存,作為標本進行檢測,如有需要可進行透析或純化處理;
2、不貼壁細胞,將培養基和細胞轉移至10ml離心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml離心管中,10000rmpx10min,-20℃或4℃保存,作為標本進行檢測,如有需要可進行透析或純化處理;
2、細胞裂解物(非分泌性蛋白)
1、貼壁細胞或半貼壁,直接將細胞培養上清吸出,然后用001MPBS(pH7.4)將細胞吹下至10ml離心管,500-800rmpx10min,棄上清,沉淀轉移至1.5ml離心管中,DDW重懸,置冰水浴中用超聲波裂解儀進行裂解,10000rmpx10min,取上清,-20℃或4℃保存,作為標本進行檢測,如有需要可進行透析或純化處理;
.2、不貼壁細胞,將培養基和細胞轉移至10ml離心管,500-800rmpx10min,棄上清,沉淀移至另一10ml離心管中,0.01MPBS(pH7.4)重懸,500-800rmpx10min,棄上清,沉淀移至1.5ml離心管中,DDW重懸,置冰水浴中用超聲波裂解儀進行裂解,10000rmpx10min,取上清,-20℃或4℃保存,作為標本進行檢測,如有需要可進行透析或純化處理。
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