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上海一研生物科技有限公司>技術文章>細胞培養片和細胞涂片

技術文章

細胞培養片和細胞涂片

閱讀:1254          發布時間:2015-7-15

組織印片
?  將潔凈載玻片輕壓于已暴露病灶的新鮮組織切面,細胞即粘附于玻片,晾干后浸入冷丙酮或醋酸-乙醇固定10min,自然干燥后染片或-20℃保存。

 細胞培養片(細胞爬片)
?  貼壁細胞培養時,置蓋片于培養瓶中,使細胞在蓋片上生長,達適當密度后取出固定(丙酮-20?C固定10~20min),再進行免疫染色。
–  蓋片的處理方法同載玻片的處理,但泡酸時間2h即可。
–  為了防止細胞脫片,可用多聚賴氨酸處理。

細胞涂片
?  大多數細胞涂片由細胞懸液制成,包括:
–  血液、尿液、腦脊液;
–  體腔積液;
–  組織穿刺吸取,如骨髓、淋巴結或其他實質性組織
–  懸浮培養的細胞或貼壁細胞經消化后形成的懸液。

細胞涂片 (續)
?  細胞涂片的方法:
–  手涂法
?  將細胞濃度調節到106/ml左右,可直接涂于載玻片上,但要均勻、不重疊。
?  圖片范圍應小于1cm直徑,以節約試劑。
–  涂片機涂片法
?  將細胞樣品制成2×105~6/ml 細胞懸液,吸取50~100?l (1~2×104~5cells) 加入涂片機內,1000rpm離心2min后細胞就均勻分布于玻片上。

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