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細胞培養片和細胞涂片
閱讀:1254 發布時間:2015-7-15組織印片
? 將潔凈載玻片輕壓于已暴露病灶的新鮮組織切面,細胞即粘附于玻片,晾干后浸入冷丙酮或醋酸-乙醇固定10min,自然干燥后染片或-20℃保存。
細胞培養片(細胞爬片)
? 貼壁細胞培養時,置蓋片于培養瓶中,使細胞在蓋片上生長,達適當密度后取出固定(丙酮-20?C固定10~20min),再進行免疫染色。
– 蓋片的處理方法同載玻片的處理,但泡酸時間2h即可。
– 為了防止細胞脫片,可用多聚賴氨酸處理。
細胞涂片
? 大多數細胞涂片由細胞懸液制成,包括:
– 血液、尿液、腦脊液;
– 體腔積液;
– 組織穿刺吸取,如骨髓、淋巴結或其他實質性組織
– 懸浮培養的細胞或貼壁細胞經消化后形成的懸液。
細胞涂片 (續)
? 細胞涂片的方法:
– 手涂法
? 將細胞濃度調節到106/ml左右,可直接涂于載玻片上,但要均勻、不重疊。
? 圖片范圍應小于1cm直徑,以節約試劑。
– 涂片機涂片法
? 將細胞樣品制成2×105~6/ml 細胞懸液,吸取50~100?l (1~2×104~5cells) 加入涂片機內,1000rpm離心2min后細胞就均勻分布于玻片上。