技術(shù)文章
常用染色液的配制
閱讀:1129 發(fā)布時(shí)間:2016-8-29常用染色液的配制
1. 福爾馬林-醋酸-酒精固定液(FAA)
50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福爾馬林(37%~40%甲醛)5ml
可用作固定植物的一般組織,但不適用于單細(xì)胞及絲狀藻類,也不適宜作細(xì)胞學(xué)研究。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收縮。若材料堅(jiān)硬,可略減冰醋酸,略增福爾馬林。若材料易收縮,可稍增加冰醋酸。久置時(shí)另加入5ml甘油以防蒸發(fā)和材料變硬。此液又可作保存液。固定時(shí)間zui多10h。如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果較好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福爾馬林5ml
2. 福爾馬林-丙酸-酒精固定液(FPA)
福爾馬林5ml + 丙酸5ml + 50%酒精90ml
固定一般的植物組織,通常固定24h,可長(zhǎng)久保存。
3. 酒精-醋酸-固定液(卡諾固定液,Carnoy fixative)
配方Ⅰ:純酒精3份 + 冰醋酸1份
配方Ⅱ:純酒精6份 + 冰醋酸1份 + 份
適用于植物組織和細(xì)胞學(xué)材料,為研究細(xì)胞分裂和染色體的優(yōu)良固定液。固定時(shí)間不宜過(guò)久。
4. 酒精-福爾馬林固定液
福爾馬林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml
固定植物一般組織,尤其適用于萌發(fā)的花粉管的固定。通常固定24h,亦可長(zhǎng)久保存。
5. 酒精-福爾馬林-甘油固定液
95%酒精150ml + 5%福爾馬林100ml + 甘油50ml
此液也可長(zhǎng)期儲(chǔ)存材料。
6. 鉻酸-醋酸固定液
根據(jù)固定對(duì)象的不同,可分為強(qiáng)、中、弱3種配方:
(1)弱液配方:10%鉻酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸餾水92.5ml
(2)中液配方:10%鉻酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸餾水83ml
(3)強(qiáng)液配方:10%鉻酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸餾水60ml
弱液配方用在固定較柔軟的材料,如藻類、苔蘚和蕨類的原葉體等。固定時(shí)間較短,一般為數(shù)小時(shí),zui長(zhǎng)可固定12~24h,但藻類和蕨類的原葉體可縮短到幾分鐘至1h。
中液配方用于固定根尖、莖尖、未成熟子房和胚珠等。為了易于滲透,可在此液中加入2%的麥芽糖或尿素。固定時(shí)間12~24h。
強(qiáng)液配方用于固定木質(zhì)根、莖、成熟子房等。為了易于滲透,可在此液中加入2%的麥芽糖或尿素。固定時(shí)間12~24h或更長(zhǎng)。