詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒技術:
本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設有限位凸起,下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋,側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設有環形凸起,兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內部設有固定桿,固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
參數規格:
產品名稱:芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒價格
英文名稱:
貨號:EY-P7408
產品規格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
產品特點
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應緩沖液經充分優化,反應靈敏快速,40個循環只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內標定量:
內標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數恒定,受環境因素影響小,內標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數量。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標序列和內參序列的擴增效率接近100%且偏差在5%以內
1、用內參基因的CT值歸一目標基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達水平比率:
2 –ΔΔCT=表達量的比值
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
猩紅S,英文名或英文縮寫:Ponceau S,級別:CP,50-60%,規格:5毫克 人脂肪酸轉運蛋白5(FATP5)免疫試劑盒 Human fatty acid anspo protein 5,FATP5 ELISA Kit
62086-04-8三扶亞錫TIN(II) TRIFLUOROmetxANESULFONATE 淋巴細胞抗原6復合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒 ,英文名: Ly6a ELISA Kit
CYCLO-PREPPLASMIDDNAPURIFICATIONKIT質粒DNA純化試劑盒生物技術級RTsigma RatcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
反式-2-癸烯醛 trans-2-Decenal,≥95.0% 3913-81-3 5ML 通用試劑 HumanCoicosterone,COELISA試劑盒人皮質同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規格:96T/48T
氫/三水/二堿式鹽/ phosphate dibasic trihydrate CP,98% 500克 國產/進口 HumanFollistatin,FSELISAKit人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規格:96T/48T
納他霉素,英文名或英文縮寫:Pimaricin,級別:BR,規格:100毫克 HumanSolubleClusterofdiffereiation21,sCD21ELISAKit 人可溶性白細胞分化抗原21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
(錄化溶液) HumanEsogen-inducedproteinpS2ELISA試劑盒人雌激素誘導蛋白PS2ELISA試劑盒規格:96T/48T
Fibrinogenfromhumanplasma血漿凝固因子250毫克BR,5-10u/mg 組織Src激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
溴酚紅;二溴酚磺酞 BroMophqnol rqd;BPR 800-80-8 HumanOrexieceptor,OXRELISAKit人食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
印度墨水 India ink (certified by the Biological... Null 100ML 染色劑 兔子白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
酚紅鈉,英文名或英文縮寫:pxenol red wo7ium salt,級別:CP,85%,規格:500毫克 RatCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISA試劑盒大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
54010-75-2三扶鋅ZINC TRIFLUOROmetxANESULFONATE HumanCoronavirusesIgGELISA試劑盒人流行性乙型腦炎抗體IgG(JEIgG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
YMMEDIUMBROTHYM 培養基肉湯生物技術級淺米黃色粉末RT不sigma HumanFolicacid,FAELISAKit人葉酸(FA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
5-甲基-2-苯基-2-己... 5-Methyl-2-phenyl-2-hexenal,≥96% 21834-92-4 10G 通用試劑 綿羊雌二醇(E2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
三苯酯/三聚酯/增塑劑/TPP CP 250克 國產/進口 人脂聯素(ADP)免疫試劑盒 Human adiponectin,ADP ELISA Kit
芥末源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒價格TRICInepUFFERTRICINE BUFFER超純級 Ratbetacellulin,BTCELISA試劑盒大鼠β細胞素(BTC)ELISA試劑盒規格:96T/48T
98-38-4Chlorometxyl metxyl 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 ,英文名: PⅢNP ELISA Kit
1乙酸,英文名或英文縮寫:2-Aminothiazol-4-acetic acid,級別:USP級,1603u/mg,規格:10KU 裸鼠環加氧酶2(COX-2)ELISA檢測試劑盒Nudemousecyclooxygenase-2,COX-2ELISAKit 96T/48T
3-(癸基二基銨)炳烷-1-磺醋內鹽 3-(Dqcyldimqthylczcniumyl)propcnq-1-sulfonctq 12163-36-7 人CD22分子(CD22)免疫試劑盒 Human CD22 ELISA Kit
GLYCEROL甘油蛋白組學級無色至幾乎無色粘稠液體RTsigma 英文名稱MouseCCKElisaKit小鼠膽囊收縮素(cck)規格:96T/48T