牛棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒是從土壤農(nóng)桿菌 CP4 菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因，是轉(zhuǎn)基因植物研究中常用的一種篩選標記基因，因此本公司根據(jù)探針法 qPCR 原理開發(fā)了專門用于檢測的試劑盒。

實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標準曲線獲得定量結果。因此，實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進入真正的指數(shù)擴增期（對數(shù)期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性*，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量準確，重現(xiàn)性的定量方法，已得到*的*，廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

產(chǎn)品名稱	英文名稱	貨號
牛棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒	Corynebacterium bovis	EY-P6586

熒光化學物質(zhì)：

實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種：熒光探針和熒光染料?，F(xiàn)將其原理簡述如下：
1. TaqMan熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析，又可分析基因突變（SNP），有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺。
2. SYBR熒光染料：在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合，因此可以通過溶解曲線，確定PCR反應是否特異。
3. 分子信標：是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結構的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補配對，導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近，不會產(chǎn)生熒光。PCR產(chǎn)物生成后，退火過程中，分子信標中間部分與特定DNA序列配對，熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光 。

熒光定量PCR服務：
公司推出，該技術不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務要求：
（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。
（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
（03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設計與合成。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結果分析。
（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結果）及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準：
  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標準。

幾種傳統(tǒng)熒光定量PCR方法簡介：

1）內(nèi)參照法：
在不同的PCR反應管中加入已定量的內(nèi)標和引物，內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標與靶模板的長度不同，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
2）競爭法：
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測定熒光強度，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
3）PCR－ELISA法：
利用或生物素等標記引物，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結合，再加入抗或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結合物，終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內(nèi)標，作出標準曲線，也可實現(xiàn)定量檢測目的。

依來藍R，英文名或英文縮寫：Eriochrome blue black R，級別：100s/盒，規(guī)格：500克  人胰高血糖素(GC)免疫試劑盒 Human Glucagon,GC ELISA Kit

16029-98-4三硅烷Iodotrimetxylsilane  人抗心1脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： ACA-IgG ELISA Kit

AMMONIUMSULFATE胺蛋白組學級白色結晶粉末RTsigma  Ratgalanin,GALELISA試劑盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羥基香茅醛 Hydroxycitronellal,≥95% 107-75-5 5ML 通用試劑  Humanepidemicparotitis,EPELISA試劑盒人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二酯酶Ⅱ/二脂酶/二酯酶/Phosphodiesterase II from bovine spleen BR，10u/mg 10U 國產(chǎn)/進口  HumanHexokinase,HKELISAKit人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
三氧化二鑭，英文名或英文縮寫：Lanthanum oxide，級別：BR，97%，規(guī)格：25毫克  組織乙酰膽堿酯酶活性熒光法定量檢測試劑盒20次

872-50-4N-甲基酮1-metxyl-2-pyrrolidinone  HumanglathioneS-ansferases,GSTsELISAKit人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

wo7iumPHOSPHATEMONODIHYDRAT嶙酸鈉50KGRT  人腺病毒IgM(ADV-IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2’-脫氧胞苷(+4℃) 2'-Dqoxycytidinq monohydrctq 921-77-9  豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)免疫試劑盒 Pig soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit

AGAROSESFR超高分辨率瓊脂糖生物技術級  Humahrombopoietin,TPOELISAkit 人血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
蘭，英文名或英文縮寫：Toluidine bule，級別：BR，98%，規(guī)格：100毫克  ELISAKitMMP-2小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A規(guī)格：48T/96T

(8-氮鳥嘌呤)  HumanAlpha-Actin,αActinELISAKit人α肌動蛋白(αActin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

花寶5號，英文名或英文縮寫：N-P-K，級別：生物技術級，98%，規(guī)格：5毫克  人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

銫標準溶液 Cqsium 7440-46-  小鼠抗小核糖核蛋白/Sm(sNP/Sm)抗體免疫試劑盒 Mouse small nuclear ribonucleoprotein(sNP/Sm)aibody ELISA kit

SSCBUFFER,20XLIQUIDCONCENTRATESSC緩沖液,20X 濃縮液超純級透明無色液體RTsigma  載脂蛋白C3(Apo C3)ELISA試劑盒 ，英文名： Apo C3 ELISA Kit
牛棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒對本二酸二100克  Chicken1,3-βDglucosidase,1,3-βD-GluELISAKit雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Spermidine3HCl 1g/5g原裝/25g原裝 Sigma S2501  人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

叔丁基本以肟碳酸酯shēng huà shì jì容量：保存：-20℃10毫克  小鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)免疫試劑盒 Mouse galactose-6-sulphate sulphatase,Gal-6S ELISA Kit

4-本基 4-Phqnylpyridinq 939-3-1  胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒 ，英文名： TLa ELISA Kit

三道定時鐘shēng huà shì jì容量：5克  MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T