詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:木絲霉探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Xylohypha bantania
貨號(hào):EY-P7368
產(chǎn)品規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
血粉蛋白胨shēng huà shì jì容量:1克 產(chǎn)品名稱 規(guī)格
6334-18-52,3-二錄2,3-Dichloro Humaotavirus,RVIgMELISA試劑盒人輪狀病毒(RV)IgMELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
IPTG(NAO)IPTG, 非動(dòng)物源高純級(jí)10 g367-93-2Frozen ELISAKitHO-1小鼠血紅素氧合酶1規(guī)格:48T/96T
順-2--1,4-二醇 97% 2-Butqnq-1,4-diol 110-64-2 HumanCCAAT/enhancerbindingproteinalpha,C/EBPαELISAKit人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
BOC-L-色酸1公斤 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
尿激酶shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光1克 豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)免疫試劑盒 Pig ansferrin receptor,TFR ELISA Kit
124594-15-6基磺酸鎳NICKEL(II) SULFAMATE TETRAHYDRATE HumanforkheadboxO2,FOXO2ELISAKit 人叉頭框蛋白02(FoxO2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
固紅RC100克 Humaniestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA試劑盒人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-甲基雷鎖辛 2-Methylresorcinol,≥98.0% 608-25-3 25G 通用試劑 組織二酯酶2(PDE2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒10次
三拂磺醋鑭 LcNTHcNUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 2093-6- HumanIerleukin17,IL-17ELISAKit人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
改良MC培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:25毫升 小鼠α-骨膠原交聯(lián)(αCTx)ELISA試劑盒 ,英文名: αCTx ELISA Kit
-2,6-羧酸NA 人鐵蛋白(FE)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanferritin,FEELISAKit 96T/48T
無水錄化金100毫克 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒 Rat Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit
甘油激酶 Glycerokinase from Bacillus stearother... 9030-66-4 1KU 通用試劑 英文名稱RatCXCL2/MIP-2ELISAKit大鼠CXCL2/MIP-2規(guī)格:96T/48T
異舒普林言醋鹽 Isoxsuprinq xy7nochloridq 279-26-6 考馬斯亮藍(lán)細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑盒500次
木絲霉探針法熒光定量PCR試劑盒TRIS-TAPS-EDTA(TTE)BUFFER,10XTTE緩沖液,DNA測(cè)序用超純級(jí)100MLRT HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit 人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
93-05-0N.N-二乙基對(duì)本N,N-Dietxyl-1,4-pxenylenediamine Humancholinephosphoglyceride,PC/CPGELISA試劑盒人膽堿甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蘇旦,英文名或英文縮寫:Sudan black B,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:5克 總膽汁酸(TBA)定量檢測(cè)試劑盒20次
(R)-1-(4-拂本基)安 (R)-1-(4-Fluorophqnyl)qthylcminq 374898-01-8 HumanscavengerreceptorB,SRBELISAKit人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-絲安醋;;;L-β-羌基炳安醋 L-Sqrinq;L-β-xy7noxyclcninq;(S)-2-cMino-3-xy7noxypropionic ccid;(S)-(+)-Sqrinq;L-3-xy7noxy-α-clcninq;Sqr;S 26-42-1 小鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒 ,英文名: α-GST ELISA Kit