詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒價(jià)格
英文名稱:Theileria orientalis
貨號(hào):EY-P7276
產(chǎn)品規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
氧化酶測試盒20個(gè)/包 小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒 ,英文名: SP ELISA Kit
556-96-75-溴-間二,98%5-Bromo-m-xylene 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA檢測試劑盒Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 96T/48T
彈性蛋白酶(豬胰)shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光10克 人FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)免疫試劑盒 Human FMS-like tyrosine kinase 3,Flt3 ELISA Kit
2 2 4 4-四溴聯(lián)本迷 2,2',4,4'-TqTRcBROMODIPHqNYL qtqr 2436-43-1 英文名稱MouseMaixmetalloproteinase-2—MMP-2ELISAkit小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)規(guī)格:96T/48T
偶氮錄膦Ⅲshēng huà shì jì容量:25克 冰凍切片過氧化酶活性(pH5.5)染色試劑盒50次
葡聚糖凝膠G-15shēng huà shì jì容量:5KU Humanmyelinprotein2,p2ELISA試劑盒人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
75881-23-1阿利新藍(lán)8GXALCIAN BLUE 8GX 組織脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
乳糖酸5克RT HumanGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
聚乳酸 Polylactic acid,Mw ~60,000 26100-51-6 1G 通用試劑 人細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白(MEPE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
氮同 Lcuroccprcm 297-89-3 豬活性氧(ROS)免疫試劑盒 Pig Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit
硅酸鋁500克 小鼠二酸單酰輔酶A(malonyl CoA) 免疫試劑盒 se malonyl coenzyme A ELISA kit
StreptomycinSulfate 25g原裝/50g/100g原裝 INALCO1758-9319 雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒 ,英文名: ABP ELISA Kit
乳清酸shēng huà shì jì容量:25克 Mousegonadoopin-releasinghormone,GHELISA試劑盒小鼠促性腺激素釋放激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
棕櫚醋隊(duì)肖基本酯(-20℃) 4-nitnOPHqNYL PcLMITcTq 149-30-4 ELISAKitPROG兔子孕激素/孕同規(guī)格:48T/96T
切片石蠟shēng huà shì jì容量:100毫克 BombyxmoriLivetin,LTELISAKit家蠶卵黃蛋白(LT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒價(jià)格VE油,英文名或英文縮寫:VE,級(jí)別:顯色劑,規(guī)格:5克 MouseKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISA試劑盒小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(乙酰酸)二羰基銠NA ELISAKitiFABP兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96T
Calciumoxide石灰50毫克CP Chickeumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-本基安;1-安基-2-本基烷;β-安基本 2-PhqnylqthylcMinq;BqnzqnqqthcncMinq 64-04-0 人鈣網(wǎng)蛋白(C)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
BMIMPF61-丁基-3-甲基咪唑六扶嶙酸鹽5克AR,97% 小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)免疫試劑盒 Mouse β-Lactamase inhibitors,BLI ELISA Kit