詳細介紹
人體脈絡膜組織提取物【Eye: Normal Human Choroidal Derivatives】
脈絡膜在視網膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細胞,對外力沖擊的耐受性較視網膜差,當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體腦膜組織中高質量的總RNA,PCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院,采集工作根據IRB和HIPAA批準的
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人體脈絡膜組織提取物培養 | Eye: Normal Human Choroidal Derivatives | EYX99345 |
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細胞培養方法;
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項;
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。
注意事項;
1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
PVP聚乙烯酮 0g Sulfamethazine578磺胺二甲嘧啶
Pyridoxal 5’-phosphate(5'-磷酸吡哆醛) 1gLomefloxacin hydrochloride9792鹽酸洛美沙星
Pyridoxine HCl(煙酸吡哆辛,維生素B6鹽酸鹽) 5g/25gTetracycline4四環素
Pyronin Y 派洛寧Y;派洛寧G 1gSulfaguanidine577磺胺脒
Rhodamine B 羅丹明B 25gGatifloxacin Mesylate3168198甲磺酸加替沙星
Drospirenone 中文名:屈螺酮 分子式:C24H30O3 度:98.0% 無水碳酸鈣 100g
Lynestrenol 中文名:利奈孕醇 分子式:C20H28O 度:98.0% Calciumte,Anhydrous 500g
Norethindrone 中文名:炔諾酮 分子式:C20H26O2 度:98.0% 化鈣 100g
Allylestrenol 中文名:烯丙雌醇 分子式:C21H32O 度:98.0% CalciumChloride,Dihydrate 500g
Estradiol-3-benzoate-17-butyrate 中文名:雌二醇-3-苯甲酸-17-丁酸酯 分子式:C29H34O4 度:98.0% 無內質粒大量提取試劑盒 5T
去氫二異丁香酚 HPLC≥98% 20mg HAMAN固著液50毫升
去氫鉤藤堿 HPLC≥98% 20mg HamsterCathepsinK,cath-KELISA試劑盒倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒規格:96T/48T
去氫荷包牡丹堿 HPLC≥98% 10mg Hamstermaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISAK倉鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
去氫駱駝蓬堿 HPLC≥98% 20mg HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA試劑盒倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
去氫毛鉤藤堿 HPLC≥98% 5mg Hanks鈣鎂平衡鹽緩沖溶液(HBSS)500毫升
去氫木香內酯 HPLC≥98% 20mg Hanks鈣鎂平衡鹽緩沖溶液(HBSS)不含NaHCO3500毫升
去氫松香酸 HPLC≥98% 20mg Hanks平衡鹽緩沖溶液(HBSS)500毫升
去氫吳茱萸堿 HPLC≥98% 10mg HARRIS蘇木素復染試劑盒50
去氫延胡索甲素硝酸鹽 HPLC≥96% 20mg HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2
去亞甲基小檗堿 HPLC≥98% 10mg HelicobacterpyloriRFLP基因分析試劑盒20
人體脈絡膜組織提取物培養兔血小板活化因子(rabbit PAF) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 5-Formyl-2-furylboronic acid 27329-70-0 中文名: 分子式:C5H5BO4 度:98.0% 關鍵詞:
兔血小板活化因子(rabbit PAF) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole 116856-18-9 中文名: 分子式:C7H9N3O3 度:98.0% 關鍵詞:
兔血小板活化因子 英文名稱: Rabbit Platelet Activating Factor 規格: 48T/96T 英文縮寫: PAF 4-Hydroxysapriparaquinone 中文名: 分子式:C20H26O4 度:%
兔血纖蛋白原elisa試劑盒 兔血纖蛋白原試劑盒 規格型號:96T/48T 兔血纖蛋白原試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:兔血纖蛋白原試劑盒、兔血纖蛋白原elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid 22252-43-3 中文名: 分子式:C8H10N2O3S
兔血纖蛋白原(Fbg)ELISAKit 4-Aminobutyric acid 中文名:4-氨基丁酸 分子式:C4H9NO2