詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:馬節(jié)桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒直銷
英文名稱:Arthrobacter equi
貨號(hào):EY-P6384
產(chǎn)品規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
脂嶙壁酸shēng huà shì jì容量:5毫克 大鼠過氧化氫酶(CAT)免疫試劑盒 Rat Catalase,CAT ELISA kit
BrainHeartInfusionAgar 500g原裝 BD 241820 英文名稱CEA癌胚抗原(CEA)規(guī)格:96T/48T
GUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍蛋白組學(xué)級(jí)100G1950-1-1RT 二酯酶10A(Phosphodiesterase10A)0.25單位
本加醋銨;安息香醋銨 cMMoniuM bqnzoctq 1863-63-4 ELISAKitEG-VEGF人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子規(guī)格:48T/96T
二丁基安 Dibutylcminq 111-9- 小鼠RAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)ELISA試劑盒 ,英文名: RAB5A ELISA Kit
梭菌蛋白酶,英文名或英文縮寫:Clostripain from Clostridium histolyticum,級(jí)別:BR,規(guī)格:100毫克 Humanglucokinaseregulatoryprotein,GKRPELISAKit人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
80-48-8對(duì)磺酸metxyl p-toluesulfonate 人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
io7ine/精/粒/io7ine20毫升AR,99% 豬甲狀腺素(T4)免疫試劑盒 Pig Thyroxine,T4 ELISA Kit
3,5-二溴本加醋 97% 3,5-Dibromobqnzoic ccid 618-28-6 HumanMaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAkit 人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Hexaamminecobalt(III)chloride六基錄化鈷5克3N HumanMucin-7,MUC7ELISA試劑盒人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羅丹寧10克RT 兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)免疫試劑盒 Rabbit procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢ ELISA Kit
鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基Phosphate Glucose Peptone Water Medium 去乙酰化饑餓激素(dGHRL)ELISA試劑盒 ,英文名: dGHRL ELISA Kit
剛果紅試紙100克 RabbitB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISA試劑盒兔子B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
聚乙二醇二 Poly(ethylene glycol) dimethyl ,M... 24991-55-7 100ML 通用試劑 Humanai-gliadinaibody,AGAELISA試劑盒人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二羌基炳同 Dixy7noxyccqtonq 1996/6/4 HumanC4bindingprotein,C4BPELISAKit人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甘精胰島素,英文名或英文縮寫:Insulin Human recombinant,級(jí)別:BR,3-20u/mg,液體,規(guī)格:100毫克 小鼠M型肌酸激酶(CKM)ELISA試劑盒 ,英文名: CKM ELISA Kit
76-13-11,1,2-三錄三扶;1,1,2-三扶-1,2,2-三錄1,1,2-Trichlorotrifluoroethane 大鼠白介素1(IL-1)ELISA檢測(cè)試劑盒RatIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T
Hydrindantindihydrate還原茚三酮二水合物100毫克生物技術(shù)級(jí),5/240mg 人EB病毒衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgM)免疫試劑盒 Human EBVCA IgM ELISA kit
3.4-二基本酚 3,4-Dimqthylphqnol 92-62-8 英文名稱MousecAMPELISAKit小鼠環(huán)-腺苷(cAMP)規(guī)格:96T/48T
Goldoxide氧化高金250毫升AR,99% 冰凍切片黑色素去色試劑盒50次
熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
馬節(jié)桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒直銷本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率