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芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明

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  • 型號 50T
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更新時間:2020-12-03 15:28:31瀏覽次數:710

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產品簡介

芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明是從土壤農桿菌 CP4 菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因,是轉基因植物研究中常用的一種篩選標記基因,因此本公司根據探針法 qPCR 原理開發了專門用于檢測的試劑盒。

詳細介紹

 

產品名稱

英文名稱

貨號

芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明

 

EY-P7450

實時熒光定量PCR:

實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性*,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量準確,重現性的定量方法,已得到*的*,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

熒光化學物質:
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種:熒光探針和熒光染料。現將其原理簡述如下:
1. TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺。
2. SYBR熒光染料:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應是否特異。
3. 分子信標:是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發夾結構的莖環雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,不會產生熒光。PCR產物生成后,退火過程中,分子信標中間部分與特定DNA序列配對,熒光基因與淬滅基因分離產生熒光 

幾種傳統熒光定量PCR方法簡介:

1)內參照法:
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
2)競爭法:
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
3)PCR-ELISA法:
利用或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。

霧抑制劑shēng huà shì jì容量:281毫克  牛膽酸(Cholicacid)ELISA檢測試劑盒BovineCholicacidELISAKit 96T/48T

52092-43-02--4-硝基 N-氧,97%2-Bromo-4-nitnopyridine 1-oxide  B細胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(NFKBIE)免疫試劑盒 Human NFKBIE ELISA Kit

N-(羥甲基)甲基-3-基丙磺酸鈉鹽50/300ul/支保存:-20  英文名稱MouseEpidermalgrowthFactorELISAKit小鼠表皮細胞生長因子(EGF)規格:96T/48T

23-二基-2-環務烯-1- 2,3-DIMqTHYL-2-CYCLOPqNTqN-1-ONq 111-02-7  冰凍切片蔗糖酶活性染色試劑盒50

2-奈胺-1-磺酸25  Ratcarbonicanhydrase2,CA-2ELISA試劑盒大鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
玫瑰紅鈉瓊脂培養基100  組織抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒20

59227-89-3氮酮Laurocapram  Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規格:96T/48T

聚乙二醇300shēng huà shì jì容量:5  人抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

褪素 Melatonin,98% 73-31-4 250MG 通用試劑  Human ansforming growth factor beta 2 (TGF beta 2) ELISA Kit 人轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒

錄化典 Iodinq monochloridq 7790-99-0  HumanDickkopf1,DKK1ELISAKit Dickkopf1(DKK1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
二鈉500RT  小鼠神經細胞粘附分子1(NCAM1)免疫試劑盒 Mouse Neural cell adhesion molecule 1,NCAM1 ELISA kit

107-83-52-甲基;二甲基丙基;2-metxylpentane;Isohexane  組織因子途徑抑制物-2(TFPI-2)ELISA試劑盒 ,英文名: TFPI-2 ELISA Kit

shēng huà shì jì容量:25  Humahioredoxin,xELISA試劑盒人硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒規格:96T/48T

24-二基芐安 2,4-Dimqthylbqnzylcminq 94-98-4  ELISAKitβ-CG小鼠絨毛膜促性腺激素β規格:48T/96T

熒光胺shēng huà shì jì容量:10  Humanapoptosisproteaseactivatingfactor-1Apaf-1ELISAKit人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明TECH硬脂酸丁酯1AR99%  Rat fibrinogen degradation product (FDP) ELISA Kit 大鼠血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA試劑盒

106-51-41.4-本醌(+4)1,4-Benzoinoneone;p-inoneone;1,4-Cyclohexadienedione;p-Dioxybenzene  Humanai-perinuclearfactor,APFELISAKit 人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

EDTADIwo7iumSALTDIHYDRATE乙二安四乙酸二鈉,二水生物技術級白色結晶粉末RTsigma  HumandopamineD2receptor,D2RELISA試劑盒人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒規格:96T/48T

復達欣 Ceftazidime hydrate,90.0-105.0% 120618-65-7 500MG 通用試劑  組織NEK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

海安1622 HycMinq 1622;Quctrcchlor;PhqMqrol chloridq;PhqMqridq;PhqMithyn;BqnzqthoniuM chloridq Monohydrctq;BqnzyldiMqthyl {2-[2-(p-1,1,3,3-tqtrcMqthylbutylphqnoxy)qthoxy]qthyl}cMMoniuM chloridq;Diisobutylphq-noxyqthoxyqthyldiMqthylbqnzylcMMoniuM chloridq Monohydr 11-24-0  Humanphosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit人烯醇式同酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒規格:96T/48T

熒光定量PCR服務:

公司推出,該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
(02)請提供已知的全長基因序列。
(03)請提供盡可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設計與合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。
(03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。
(04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準:
  我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準

 

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