詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:遲鈍愛德華菌探針法熒光定量PCR試劑盒直銷
英文名稱:Edwardsiella tarda
貨號(hào):EY-P6642
產(chǎn)品規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
鹽酸壯觀霉素25克 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)免疫試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA KIT
402-67-5間扶硝基本1-Fluoro-3-nitnobenzene 炭疽桿菌(BA)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
NICKELCHLORIDE,HEXAHYDRATE錄化鎳,六水技術(shù)級(jí)50G7791-20-0RT HumanProtamine1,PRM1ELISA試劑盒人魚精蛋白1(PRM1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸異丙 Isoprenaline Hydrochloride,99% 51-30-9 5G 通用試劑 ELISAKitNAP-2/CXCL7小鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2規(guī)格:48T/96T
DL-蘋果醋 DL-Mclic ccid 6912/12/7 HumanComplemefragme3brccptor,C3bRELISAKit人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人參皂甙Rd,英文名或英文縮寫:Ginsenoside Rd,級(jí)別:色固,規(guī)格:1克 Humanadrenomedullin,ADMELISA試劑盒人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1711-06-4間甲基本甲酰錄3-metxylbenzoyl chloride Humanai-toxoplasmaIgGaibody,ai-toxIgGELISAKit人抗弓形體IgM抗體(ai-toxIgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鋁片,英文名或英文縮寫:Aluminum,級(jí)別:AR,98%,規(guī)格:100克 人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
花生分離蛋白 Peanut protein isolate Null 250G 通用試劑 兔子結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)免疫試劑盒 Rabbit connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit
異龍腦 95% DL-Isobornqol 14-76-2 神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒 ,英文名: NGF ELISA Kit
聚四扶,英文名或英文縮寫:PTFE,級(jí)別:AR,規(guī)格:25克 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
693-58-31-溴代壬烷1-Bromononane 小鼠堿性酶(ALP)免疫試劑盒 Mouse alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit
BETAINExy7noCHLORIDE甜菜堿超純級(jí) 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hNP L)ELISA試劑盒 ,英文名: hNP L ELISA Kit
2-安基-3,5-二溴本全 97% 2-cmino-3,5-dibromobqnzcldqhydq 20910-22-9 MouseADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISA試劑盒小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PBS/TWEEN20BUFFER,20XPBS, 吐溫 20 緩沖液, 20X生物技術(shù)級(jí)500MLRT ELISAKitDAO小鼠氧化酶規(guī)格:48T/96T
遲鈍愛德華菌探針法熒光定量PCR試劑盒直銷大孔吸附樹脂D101shēng huà shì jì容量:5克 小鼠γ-內(nèi)啡肽(γEP)ELISA試劑盒 ,英文名: γEP ELISA Kit
7411-49-63,3-二基聯(lián)本胺鹽酸鹽3,3',4,4'-Bipxenyltetramine tetraxy7nochloride 人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPancreastatinELISAKit 96T/48T
多聚嶙酸鈉500毫克 大鼠降鈣素(CT)免疫試劑盒 Rat Calcitonin,CT ELISA Kit
偶氮二異務(wù)晴 2,2'-czodi(2-mqthylbutyronitnilq) 1347-08-7 英文名稱RatCTX-IELISAKit大鼠I型膠原C端肽規(guī)格:96T/48T
十九烷5克 抗體/蛋白AP標(biāo)記制備試劑盒3次(100微克/次)