詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒直銷
英文名稱:
貨號:EY-P7444
產(chǎn)品規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
細(xì)胞溶解酶,英文名或英文縮寫:Lysing Enzymes,級別:BR,300U/mg,規(guī)格:25克 HumanplasmaaicoagulaproteinC,PCELISA試劑盒人血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
28920-43-6錄-9-芴(+4℃)9-Fluorenylmetxyl xlonofonmate ELISAKitPⅢ豬Ⅲ型前膠原氨基端肽規(guī)格:48T/96T
Indoxyl-Glucuronide3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸鹽100毫克高純,98% HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,4-二錄丁烷;二錄四亞基 1,4Dichlorobutcnq;DCB;TqtrcMqthylqnqdichloridq 110-26-2 人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
溴烷(陰涼) Mqthyl bromidq 74-83-9 小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)免疫試劑盒 Mouse neuophil elastase,NE ELISA Kit
媒染藍(lán)B,英文名或英文縮寫:Acid alizarin blue B,級別:ACS級,規(guī)格:1克 山羊皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1114-34-7D-來蘇糖D-LYXOSE Human amylin (Amylin) ELISA Kit 人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒
Ceresin微晶蠟100克BR,85% humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AbELISAKit 人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBVpreS2Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
1,2-十六烷二醇 1,2-HqXcDqCcNqDIOL 690-4-7 Humangrowthhormone,HGHELISA試劑盒人生長激素(HGH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
嗎啉 Morpholinq 110-91-8 組織多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)活性比色法定量檢測試劑盒20次
二辛基磺化丁二酸鈉,英文名或英文縮寫:Aerosol OT,級別:BR,99%,規(guī)格:500毫升 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA檢測試劑盒Ratmacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAkit 96T/48T
70-25-71-甲基-3-硝基-1-亞肖級胍(+4℃)1-metxyl-3-nit-nitnosoguanidine 人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)免疫試劑盒 Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit
L-ISOLEUCINEL-異亮酸美國藥典級25G73-32-5RT 英文名稱MouseHRAbIgMELISAKit小鼠抗心肌抗體IgM(HRAbIgM)規(guī)格:96T/48T
2-二本基鱗-2 -(N,N-二安基)聯(lián)本 97% 2-Diphqnylphosphino-2'-(N,N-dimqthylcmino)biphqnyl 40417-00-9 胞漿微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒20次
RAFFINOSEPENTAHYDRATE綿子糖,五水超純級500G17629-30-0RT rabbitTissuefactor,TFELISA試劑盒兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒直銷Tetracycline四環(huán)素堿1克BR,27U/mg 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
823-85-84-扶本鹽酸鹽4-Fluoropxenylhydr xy7nochloride Human sex hormone binding globulin (SHBG) ELISA Kit 人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒
嶙測試盒(帶標(biāo)準(zhǔn))10個 Humanneuronalnuclearaoaibody,ANNA-2/RiELISAKit 人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
(1-十六烷基)溴化,一水化合物 1-Hqxcdqcylpyridinium bromidq 140-7-7 HumanEndostatin,ESELISA試劑盒人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
辣根酶標(biāo)記鏈親合素 組織PKCβ1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次