非洲豬瘟病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒直銷是從土壤農(nóng)桿菌 CP4 菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因，是轉(zhuǎn)基因植物研究中常用的一種篩選標(biāo)記基因，因此本公司根據(jù)探針?lè)?qPCR 原理開(kāi)發(fā)了專門用于檢測(cè)的試劑盒。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：非洲豬瘟病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒直銷
英文名稱：African Swine Fever Virus(ASFV)
貨號(hào)：EY-P6360
產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開(kāi)了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無(wú)熒光， R與Q分開(kāi)，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 中性紅50克2～8℃  Porcinemacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酵母氮源基礎(chǔ)NA  Humanalpha-L-fucosidase,AFUELISA試劑盒人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
PCRDNAMARKERPLUSDNA Marker生物技術(shù)級(jí)250 lFrozen  HumanAquaporin2，AQP-2ELISAKit人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
博來(lái)霉素 Bleomycin sulfate 9041-93-4 25MG 通用試劑  人β羥(β-OHB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
DL-2,3-二安基炳醋言醋鹽 DL-2,3-DIcMINOPROPIONIC cCID MONOxy7noCHLORIDq 24897-29-2  兔子骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒 Rabbit bone sialoprotein,BSP ELISA Kit
碳化硅1克RT  組織組蛋白脫乙?；?HDAC)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
96-43-52-錄1吩2-Chlorothiopxene  Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鋁shēng huà shì jì容量：100毫克  人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
O,P'-2,4-DDT 789-0-6  豬脯氨酸羥化酶(PHD)免疫試劑盒 Pig prolyl hydroxylases,PHD ELISA Kit
亞鈉瓊脂shēng huà shì jì容量：1公斤  HumanIerleukin11,IL-11ELISAKIT 人白介素11(IL-11)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
馬鈴薯葡萄糖瓊脂100克  兔乙?；囸I激素(aGHRL)免疫試劑盒 Rabbit acylated appetite-regulating hormone,aGHRL ELISA kit
13586-38-4鈷銨Ammonium cobalt(II) sulfate hexahydrate  親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA試劑盒 ，英文名： PPIA/CYPA ELISA Kit
本甲脒瓊脂糖凝膠4FF1克2～8℃  rabbitC-ReactiveProtein,CRPELISA試劑盒兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
2-苯氧基溴 β-Bromophenetole,98% 589-10-6 5G 通用試劑  Humanai-livercellmembraneaibody,LMAELISA試劑盒人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
三氧化二銻 Dicntimony trioxidq 1309-64-4  Humancarcinoembryonicaign,CEAELISAKit人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
甘油5毫克2～8℃  MonkeyIerleukin-8,IL-8ELISAKit白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
63-37-6胞苷酸Cytidylic acid  CLIAKitforBLC-1/CXCL13(HumanB-LymphocyteChemoatacta1,BLC-1)ELISAKit人B-淋巴細(xì)胞趨化因子規(guī)格：48T/96T
非洲豬瘟病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒直銷氧化亞銅shēng huà shì jì容量：500克  細(xì)菌離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
4,5-二基咪唑 4,5-oimidazole,99.0% 1122-28-7 5G 通用試劑  RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAKit兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L-鳥(niǎo)安醋言醋鹽 L(+)-Ornithinq xy7nochloridq 3184-13-  豚鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒 ，英文名： ECF ELISA Kit