ELISA試劑盒先要確定兩種酶標二抗使用的是不是同一批包被的板，因為雖然是相同的抗原，可能兩次包被不一樣。
如果是同一批板，出現這種情況只能說明你的酶標二抗失活了，買新的二抗，按說明書上的稀釋倍數稀釋；陰性對照有顏色很可能是沒封閉好。陽性值是由你的抗原抗體間親和力決定的，增加抗原抗體用量，或提高二抗濃度，但靈敏度可能會降低，你可以重新摸下工作濃度；
ELISA試劑盒陰性值降低，你可以采用BSA封閉2小時看看，好像沒聽說有人用FCS封閉的，你可以嘗試采用其他的封閉液，據我了解，用BSA封閉不是很好，可以試試脫脂奶粉；再就是TMB本身時間長了就會略顯色，你可以調整顯色時間。
ELISA試劑盒說明：
1．檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
2．試劑盒保存：-20℃(較長時間不用時)；2-8℃(頻繁使用時)。
3．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
4．中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。
5．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 ，英文名： TFPI ELISA Kit
小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒 ，英文名： HBeAb ELISA Kit
小鼠乙酰*(acetyl-CoA)ELISA試劑盒 ，英文名： acetyl-CoA ELISA Kit
小鼠乙酰*轉移酶(CHAT)ELISA試劑盒 ，英文名： CHAT ELISA Kit
小鼠乙酰*酯酶(AchE)ELISA試劑盒 ，英文名： AchE ELISA Kit
小鼠乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 ，英文名： AChRab ELISA Kit
小鼠乙酰*(ACH)ELISA試劑盒 ，英文名： ACH ELISA Kit
小鼠胰脂肪酶(PL)ELISA試劑盒 ，英文名： PL ELISA Kit
小鼠*(PK)ELISA試劑盒 ，英文名： PK ELISA Kit
小鼠胰高血糖素樣肽2(GLP-2)ELISA試劑盒 ，英文名： GLP-2 ELISA Kit
小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒 ，英文名： GLP-1 ELISA Kit
小鼠胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒 ，英文名： GC ELISA Kit
小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 ，英文名： Amylin ELISA Kit
小鼠胰島細胞抗體(ICA)ELISA試劑盒 ，英文名： ICA ELISA Kit
