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ELISA試劑盒的模式

閱讀:350發(fā)布時(shí)間:2015-10-14

每種試劑都有其反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng),會(huì)造成整板本底高,陽(yáng)性率高。

酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀,通常指于測(cè)讀ELISA試劑盒結(jié)果吸光度的光度計(jì)。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有:測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、度和可測(cè)范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可到0.001,準(zhǔn)確性為±1%,重復(fù)性達(dá)0.5%。酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,操作時(shí)室溫宜在15~30℃,使用前先預(yù)熱儀器15-30 分鐘,測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。

以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長(zhǎng)為450nm,后者為492nm,濾光片需根據(jù)要求隨時(shí)更換。酶標(biāo)儀給出的數(shù)值為敏感波長(zhǎng)下的吸光度值與非常感波長(zhǎng)下的吸光度值的差。以軟板為載體的試驗(yàn),需先將板置于尺度96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。ELISA試劑盒比色時(shí)應(yīng)先以蒸餾水校零點(diǎn),測(cè)讀底物孔(未經(jīng)任何反應(yīng)僅加底物液的孔)和空缺孔(以生理鹽水或稀釋液代替標(biāo)本作全過(guò)程的孔),以記實(shí)本次試驗(yàn)的試劑狀況。


ELISA試劑盒就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時(shí)應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)。可以說(shuō)在ELISA試劑盒操作中,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),應(yīng)引起操作者的高度重視,操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌,不得馬虎。
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IGLON5 IgLON家族蛋白5抗體
IKAROS 鋅指蛋白IKAROS抗體
Igj 免疫球蛋白j鏈抗體
IP3 receptor 5-三磷酸肌醇受體1抗體
ITPR2 5-三磷酸肌醇受體2抗體
ID3 DNA結(jié)合抑制因子3抗體
CD275 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體
IGSF12 免疫球蛋白超家族成員12抗體
IDH3A 草酰琥珀酸脫羧酶α抗體
IFNA5 干擾素alpha 5蛋白抗體
IGF I 胰島素樣生長(zhǎng)因子1抗體
IKK beta KB抑制蛋白激酶β抗體
Involucrin 囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體
Insulin Receptor R 胰島素受體相關(guān)受體抗體


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