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ELISA試劑盒干細胞生物學性狀的研究

閱讀:182發布時間:2016-1-21

目前國內外均有成功分離羊水來源干細胞的報導,ELISA試劑盒大多是利用羊水細胞貼壁的特點通過多次傳代的方法獲得干細胞。Tsai MS 等采用兩步培養法從孕中期羊水中成功分離出具有MSCs 特征的干細胞。隨后De Coppi 等通過免疫磁珠方法分離出c - Kit ( CD117) 陽性細胞,這些細胞在體外增殖迅速,可以形成穩定的細胞系,他將這些細胞命名為羊水干細胞。此外通過克隆化培養的方法也可以從羊水中獲得干細胞。ELISA試劑盒從現有研究情況看來,目前尚未形成統一的羊水干細胞培養體系。
本實驗采用貼壁法分離獲得羊水細胞,培養細胞使用低糖DMEM 培養基。收集的20 例羊水標本中有17 例原代培養成功,并獲得可以持續傳代的穩定細胞系。培養的羊水細胞體外增長迅速,ELISA試劑盒倍增時間約36h。流式細胞儀檢測顯示細胞表達CD29、CD44、CD105 等間充質干細胞表面標志,不表達造血干細胞表面標志CD45 和CD133。RT - PCR 的結果表明分離獲得的干細胞表達Oct - 4 和Nanog 基因,且不同代的細胞間均有表達。Oct - 4 和Nanog 被認為是干細胞多能分化的主要調節因子,干細胞分化后其表達立即下調。以上結果與文獻報道一致,表明羊水細胞經體外培養擴增可以得到具有MSCs 性質的干細胞。


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