分子信標的發展
閱讀：240發布時間：2015-3-11
分子信標是一種設計巧妙的熒光探針。在長度為15-30mer寡核昔酸探針的兩端分別加上5-8mer序列互補的莖桿區。在自由狀態時由于莖桿區互補序列的結合使探針分子形成發夾狀結構，所以又被稱為發夾探針。探針的5'端及3'端分別聯用熒光素分子及碎滅劑分子。ELISA為經典的分子信標結構，其中1-氨基蔡-8-叛酸（EDANS）為熒光素，二甲氨基偶氮苯甲酚（DABSYI.）為猝滅劑。自由狀態時，發夾結構的兩個末端靠近，使熒光分子與碎滅分子靠近（約為7-1Onm）。此時發生熒光共振能量轉移，使熒光分子發出的熒光被碎滅分子吸收并以熱的形式散發，熒光幾乎*被猝滅，熒光本底極低。為分子信標的工作原理，當分子信標與序列*互補的靶標分子結合形成雙鏈雜交體時，信標莖桿互補區被拉開，熒光分子和碎滅分子距離增大。根據Foerster理論，中心熒光能量轉移效率與兩者距離的6次方成反比。雜交后，信標分子的熒光幾乎*恢復。且所檢測到的熒光強度與溶液中靶標的量成正比。
分子信標中zui常用的猝滅劑是DABSYL，ELISA它對多種熒光素都有較強的熒光猝滅效率。近來Dubertret等用金納米粒子簇代替DABSYL做猝滅劑，人們還可以通過調節金屬納米簇的形狀、大小和組成而得到不同的猝滅劑。由于金納米簇對熒光試劑有著更高的猝滅效率，所以用金納米粒子代替DABSYL后，大大提高了分子信標的靈敏度和特異性
分子信標這一熒光信號傳導機制是基于熒光能量轉移基礎上的?？赡苡袃煞N能量轉移的形式存在：直接的能量轉移和熒光共振能量轉移。當熒光基團和猝滅基團距離很近時，由于兩個基團分子相互碰撞可產生直接的能量轉移。當兩個基團的距離在且能量給體（熒光基團）的發射光譜與能量受體（猝滅基團）的吸收光譜有較大程度的重疊時，則可發生熒光共振能量轉移。由于已發現（二甲基胺基苯基）偶氮苯甲酸可作為分子信標通用的猝滅基團，它對多種發射光譜不同的熒光基團都有很好的猝滅作用。因此，直接的能量轉移可能是一種主要的熒光能量轉移機制。
分子信標zui初被用作聚合酶鏈反應（PCR）的熒光探針，分子信標工作原理，它既可以對擴增產物進行定量檢測，又可以對擴增的過程進行實時的監測zui近國內孔德明等設計出了TagMan分子信標，也是一種性能良好的PCR熒光探針。
