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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-12-20 13:55:38瀏覽次數(shù):689次
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* 1.075200mL說(shuō)明書(shū)的產(chǎn)品圖片:
注意:
1. * 1.075200mL說(shuō)明書(shū)對(duì)大腸桿菌可從固體培養(yǎng)基上挑取單個(gè)菌落直接進(jìn)行煮沸法提取質(zhì)粒DNA。
2. 煮沸法中添加*有一定限度,濃度高時(shí),細(xì)菌裂解效果反而不好。有時(shí)不同*也能溶菌。
3. 提取的質(zhì)粒DNA 中會(huì)含有RNA,但RNA 并不干擾進(jìn)一步實(shí)驗(yàn),如限制性內(nèi)切酶消化,亞克隆及連接反應(yīng)等。
操作流程:
1. * 1.075200mL說(shuō)明書(shū)根據(jù)要保存的各樣本的體積,計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍(100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集2×107細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原則是:量寧多勿少。建議在實(shí)際操作中不要稱量組織,而直接根據(jù)目測(cè)結(jié)果加入RNAwait量,以加快操作和減少污染。例如5mm邊長(zhǎng)的立方體組織塊,體積為125mm3=125µl,故應(yīng)當(dāng)加入1.25ml的RNAwait液。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中。
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,較小的組織直接取下,立即*浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過(guò)厚則RNAwait不能有效滲入,組織中間部位的RNA不能受到保護(hù)。較大的組織可以切成厚度<0.5 cm的任意片狀后保存,較小的組織(如大鼠的腎臟、脾臟,小鼠的大部分器官)則可以直接浸入RNAwait。
4. 將收集管存放于溫度適當(dāng)?shù)牡胤剑娣艜r(shí)間不能超過(guò)該溫度下的長(zhǎng)存放時(shí)間(請(qǐng)看技術(shù)指標(biāo)),如果要存放在-20℃或-80℃,需先將樣品在4℃放置過(guò)夜后再轉(zhuǎn)移到后的溫度。注:將樣品轉(zhuǎn)移到-20℃或-80℃前,需要棄掉保護(hù)液。
* 1.075200mL說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)要點(diǎn) :
1.CTAB 溶液在低于15℃時(shí)會(huì)析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預(yù)熱。
2.在適條件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過(guò),某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質(zhì),特別是多糖,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質(zhì)變性,但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可減輕這兩種現(xiàn)象,同時(shí)可加入適量的(*——=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白質(zhì)層緊密,使水相和有機(jī)相分層較好。 細(xì)菌的培養(yǎng)和收集 將含有質(zhì)粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24 小時(shí)。用無(wú)菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12 小時(shí)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期。非凍型組織RNA保存液 小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA 十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速,能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA 有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
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* 1.075200mL說(shuō)明書(shū) Tri-tert-butylphosphine 質(zhì)量規(guī)格:1.0 M in tolueneCAS: 13716-12-6
Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate 質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(N)CAS: 122555-91-3
Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)CAS: 137076-54-1
TRISTEARIN 質(zhì)量規(guī)格:鑒別CAS: 68334-00-9
Trisbromoneopentyl Alcohol 質(zhì)量規(guī)格:>97%CAS: 36483-57-5
Tris(bathophenanthrolinedisulfonate)ruthenium(II) sodium salt solution 質(zhì)量規(guī)格:1mM,BCCAS: 301206-84-8
Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionato)praseodymium(III) 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)CAS: 17978-77-7
Tris(4-iodophenyl)amine 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)CAS: 4181-20-8
Tris(2-chloroethyl) Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)CAS: 115-96-8
Tris(2-butoxyethyl) Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)CAS: 78-51-3
Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III) 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T)CAS: 15492-48-5
Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III) 質(zhì)量規(guī)格:>95%(T)CAS: 15522-71-1
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商鋪:http://www.cmr6829.com/st152071/
主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA 試劑盒,ELISA免費(fèi)代測(cè),中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑,科研抗體,美國(guó)ATCC細(xì)胞株,生物培養(yǎng)基等產(chǎn)品經(jīng)營(yíng).
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