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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間：2018-12-20 16:42:20瀏覽次數(shù)：319次
聯(lián)系我時，請告知來自 智慧城市網(wǎng)人結(jié)直腸癌細胞；T84特性冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase *儲存。
以下是人結(jié)直腸癌細胞；T84特性產(chǎn)品信息的認購信息：
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細胞名稱 人結(jié)直腸癌細胞；T84特性
形態(tài)特性 上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 T84細胞來源于一位72歲的男性結(jié)直腸癌患者的肺部轉(zhuǎn)移灶；皮下接種至BALB/c裸鼠并連續(xù)傳代23次后建立該細胞系。在裸鼠身上傳代的過程中，該腫瘤仍保持原始的結(jié)直腸癌的組織學特性。T84細胞系生長至匯合狀態(tài)時形成單層細胞，相鄰細胞間有緊密連接和細胞橋粒；該細胞有多種肽類激素和神經(jīng)遞質(zhì)的受體，維持電解質(zhì)的定向運輸；角蛋白陽性。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：10；D13S317：9；D16S539：10，11；D18S51：17；D19S433：13；D21S11：31；D2S1338：23，26；D3S1358：19；D5S818：12；D7S820：8，10；D8S1179：15；FGA：24；TH01：6，9；TPOX：8，11；vWA：17，18；
同工酶
染色體 51~60
使用權(quán)限 A類
細胞種類：
人結(jié)直腸癌細胞；T84特性凍存
對培養(yǎng)的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養(yǎng)基的冰點，并可減緩冷卻速度嗎，大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞，導致細胞死亡)。
注：DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時，應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范，并應(yīng)按照當?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時，必須遵守以下原則。與其他細胞培養(yǎng)操作一樣，我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明，以便獲得結(jié)果。
1）在高細胞濃度情況下進行培養(yǎng)細胞的凍存，并且細胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2）細胞應(yīng)緩慢冷凍，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3）必須使用*的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4）將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存；溫度高于 -50°C 時，冷凍的細胞將開始變質(zhì)。
5）必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6）必須穿戴個人防護設(shè)備。
7）所有與細胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術(shù)，并且在層流通風櫥內(nèi)進行。
以下是人結(jié)直腸癌細胞；T84特性的相關(guān)產(chǎn)品：
包裝：5 × 105次方（1ml）*心肌成纖維細胞
包裝：5 ×105次方（1ml）*心肌細胞
包裝：5 ×105次方（1ml）*心肌細胞
包裝：5 ×105次方（1ml）*心肌細胞
包裝：5 × 105次方（1ml）*心室肌細胞
包裝：5 × 105次方（1ml）*心臟微血管內(nèi)皮細胞
Rabbit Complement 3,C3 ELISA Kit進口/分裝
Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 進口/分裝
Rabbit catecholamine,CA ELISA Kit *
Rabbit Leptospira IgG,Lep IgG ELISA Kit 進口/分裝
Rabbit Osteoprotegerin,OPG ELISA Kit 進口/分裝
Rabbit Osteopontin,OPN ELISA Kit *
Rabbit bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit *
Rabbit Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit *
Rabbit receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit *
Rabbit nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit進口/原裝
Rabbit cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit*
Rabbit Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA Kit *
Rabbit matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA Kit 進口/原裝
Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit進口/原裝
人結(jié)直腸癌細胞；T84特性Phospho-HSP27 (Ser15) 磷酸化熱休克蛋白27多克隆抗體 規(guī)格 0.1ml*
Phospho-HSL (Ser959+960) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶多克隆抗體 規(guī)格 0.1ml*
Phospho-HSL (Ser865) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶多克隆抗體 規(guī)格 0.1ml*
Phospho-HSL (Ser863) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶多克隆抗體 規(guī)格 0.1ml*
Phospho-HSL (Ser660) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶多克隆抗體 規(guī)格 0.1ml*
phospho-HSF1(Ser326) 磷酸化熱休克因子1多克隆抗體 規(guī)格 0.1ml*
phospho-HSF1(Ser307) 磷酸化熱休克因子1多克隆抗體 規(guī)格 0.1ml*
phospho-HSF1(Ser303) 磷酸化熱休克因子1多克隆抗體 規(guī)格 0.2ml*
phospho-HRH1(Ser398) 磷酸化組胺受體H1多克隆抗體 規(guī)格 0.1ml*
Phospho-HP1(Tyr43) 異染色質(zhì)蛋白1磷酸化多克隆抗體（果蠅） 規(guī)格 1ml*
Phospho-HP1 gamma (Ser93) 磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ多克隆抗體 規(guī)格 0.1ml*
phospho-HP1 alpha (Tyr24) 磷酸化異染色質(zhì)蛋白1多克隆抗體（果蠅） 規(guī)格 1ml*
凍存培養(yǎng)基：
人結(jié)直腸癌細胞；T84特性凍存細胞時必須使用*的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.人結(jié)直腸癌細胞；T84特性配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用*、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
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