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人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞；HuH-6特性

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更新時(shí)間：2018-12-24 11:36:59瀏覽次數(shù)：265次

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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞；HuH-6特性冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase *儲(chǔ)存。

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱 人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞；HuH-6特性
形態(tài)特性上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)

特征特性據(jù)報(bào)道產(chǎn)球蛋白和甲胎蛋白。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法消化3-5分鐘。1：

2。6-7天長(zhǎng)滿。

傳代情況 PN5

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測(cè) 陰性　

STR Amelogenin:X,Y；CSF1PO:10,12；D13S317:8,12；D16S539:10,11；D18S51:13,21；D19S433:12,12.2；D21S11:29,30；D2S1338:18；D3S1358:14,17；D5S818:8,11；D7S820:11,12；D8S1179:10,11；FGA:19,24；TH01:7,8；TPOX:8；vWA:14,17

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
以下是 人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞；HuH-6特性產(chǎn)品信息的認(rèn)購(gòu)信息：

凍存培養(yǎng)基：
人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞；HuH-6特性凍存細(xì)胞時(shí)必須使用*的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞；HuH-6特性配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用*、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低 1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
細(xì)胞種類：
人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞；HuH-6特性凍存
對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行凍存的方法是將細(xì)胞置于含有(DMSO)等冷凍保護(hù)劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲(chǔ)存。冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn)，并可減緩冷卻速度嗎，大大降低冰晶形成的危險(xiǎn) (冰晶可損傷細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。
注：DMSO 可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí)，應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范，并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則
凍存細(xì)胞系以備將來(lái)之用時(shí)，必須遵守以下原則。與其他細(xì)胞培養(yǎng)操作一樣，我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說(shuō)明，以便獲得結(jié)果。
1）在高細(xì)胞濃度情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，并且細(xì)胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請(qǐng)注意凍存條件取決于所用細(xì)胞系。
2）細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3）必須使用*的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑
4）將冷凍的細(xì)胞于 -70°C 以下溫度儲(chǔ)存；溫度高于 -50°C 時(shí)，冷凍的細(xì)胞將開(kāi)始變質(zhì)。
5）必須使用無(wú)菌凍存管儲(chǔ)存冷凍的細(xì)胞。裝有冷凍細(xì)胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6）必須穿戴個(gè)人防護(hù)設(shè)備。
7）所有與細(xì)胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無(wú)菌狀態(tài)。必須采用正確的無(wú)菌技術(shù)，并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。
以下是人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞；HuH-6特性的相關(guān)產(chǎn)品：
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