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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時間:2019-01-03 17:12:42瀏覽次數(shù):390次
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小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞;MNSK/HL-006特性冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase *儲存。
以下是小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞;MNSK/HL-006特性產(chǎn)品信息的認(rèn)購信息:?
細(xì)胞名稱 小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞;MNSK/HL-006特性
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞種類:
小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞;MNSK/HL-006特性凍存
對培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行凍存的方法是將細(xì)胞置于含有(DMSO)等冷凍保護(hù)劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲存。冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險(xiǎn) (冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。
注:DMSO 可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時,應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則
凍存細(xì)胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細(xì)胞培養(yǎng)操作一樣,我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說明,以便獲得結(jié)果。
1)在高細(xì)胞濃度情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,并且細(xì)胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細(xì)胞系。
2)細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用*的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑
4)將冷凍的細(xì)胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細(xì)胞將開始變質(zhì)。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細(xì)胞。裝有冷凍細(xì)胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6)必須穿戴個人防護(hù)設(shè)備。
7)所有與細(xì)胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術(shù),并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。
以下是小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞;MNSK/HL-006特性的相關(guān)產(chǎn)品:
質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRGlycyrrhizicacid甘草酸
質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,sigmaA6664Glycyrrhizicacid甘草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)
質(zhì)量規(guī)格:0.98Glycyrrhizicacidammoniumsalt*鹽
質(zhì)量規(guī)格:BR,>98%Glycyrrhizicacidammoniumsalt*鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)
質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDiammoniumGlycyrrhizate*鹽
質(zhì)量規(guī)格:0.98DiammoniumGlycyrrhizate*鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)
質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRDipotassiumglycyrrhizinate*(標(biāo)準(zhǔn)品)
質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定SodiumGlycocholateHydrate甘膽酸鈉;甘氨膽酸鈉
IGF2BP1/IMP1胰島素樣生因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格:0.2ml
Phospho-PIM1(Tyr218)磷酸化前病毒整合位點(diǎn)蛋白1抗體規(guī)格:0.1ml
Ki-67(ProliferationMarker)Ki67蛋白抗體規(guī)格:0.1ml
SDCCAG8結(jié)腸抗原8抗體規(guī)格:0.2ml
Rabbitanti-mouseKappalightchain/AlexaFluor647AlexaFluor647標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈規(guī)格:0.1ml
CD15/Fut4/SSEA-1階段特異性胚胎表面抗原-1抗體規(guī)格:0.1ml
C6orf646號染色體開放閱讀框64抗體規(guī)格:0.2ml
PPO樣特異性相關(guān)抗原PPO抗體規(guī)格:0.2ml
Nectin3/CD113細(xì)胞粘附分子3抗體(脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)蛋白3)規(guī)格:0.1ml
C22orf2522號染色體開放閱讀框25抗體規(guī)格:0.2ml
小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞;MNSK/HL-006特性RGAG4 RGAG4蛋白多克隆抗體 0.2ml
RGC32 補(bǔ)體應(yīng)答基因32多克隆抗體 0.2ml
RGS19 G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19多克隆抗體 0.2ml
RGS2 G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2多克隆抗體 0.1ml
RGS4 精神分裂癥相關(guān)蛋白9多克隆抗體 0.2ml
RGS5 G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5多克隆抗體 0.2ml
RHBDD3 垂體瘤細(xì)胞凋亡多克隆抗體 0.2ml
RHCE Rh血型C抗原多克隆抗體 0.2ml
RHCG RH血型C糖蛋白多克隆抗體 0.2ml
RHEB Ras蛋白腦組織同源類似物RHEB蛋白多克隆抗體 0.1ml
rhIL-18 *18多克隆抗體 0.1ml
Rho C RhoC多克隆抗體 0.1ml
凍存培養(yǎng)基:
小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞;MNSK/HL-006特性凍存細(xì)胞時必須使用*的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞;MNSK/HL-006特性配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用*、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
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