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上海撫生實業有限公司
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小鼠黑色素瘤細胞；B16特性冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase *儲存。
以下是 小鼠黑色素瘤細胞；B16特性產品信息的認購信息：
細胞名稱 小鼠黑色素瘤細胞；B16特性
形態特性 梭形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞源于C57BL/6J小鼠黑色素瘤，可以產生黑色素，同基因小鼠體內移植可成瘤。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1：
3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN2
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體 60-76
使用權限 A類
凍存培養基：
小鼠黑色素瘤細胞；B16特性凍存細胞時必須使用*的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養基。
1）細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2）凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
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細胞種類：
小鼠黑色素瘤細胞；B16特性凍存
對培養的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養基的冰點，并可減緩冷卻速度嗎，大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞，導致細胞死亡)。
注：DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時，應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范，并應按照當地法規處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時，必須遵守以下原則。與其他細胞培養操作一樣，我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明，以便獲得結果。
1）在高細胞濃度情況下進行培養細胞的凍存，并且細胞傳代次數盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2）細胞應緩慢冷凍，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3）必須使用*的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4）將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存；溫度高于 -50°C 時，冷凍的細胞將開始變質。
5）必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內保存
6）必須穿戴個人防護設備。
7）所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態。必須采用正確的無菌技術，并且在層流通風櫥內進行。
培養細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.小鼠黑色素瘤細胞；B16特性配制凍存培養基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用*、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
以下是小鼠黑色素瘤細胞；B16特性的相關產品：
質量規格：>98%,BRRamipril-d3*-d3
質量規格：>90%,BRRamiprilat*拉
質量規格：含量測定，標準品Ramiprilat-d5*拉-d5
質量規格：>98%StrontiumRanelate雷奈酸鍶
質量規格：HPLC≥98%，標準品Ranitidine*
質量規格：>98%Ranitidine-N,S-dioxide*-N,S-二氧化物
質量規格：>98%RanitidineN-Oxide*N-氧化物
質量規格：大于98%，化學純RanitidineS-Oxide*S-氧化物
Phospho-NFKB1(Ser907)磷酸化細胞核因子p50/k基因結合核因子抗體規格:0.1ml
Acetyl-HistoneH3(K9)乙酰化組蛋白H3抗體規格:0.1ml
Nucleostemin核干細胞因子抗體(*核苷酸結合蛋白3)規格:0.2ml
FABP4脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白規格:0.1ml
PLAGL2多形性瘤基因樣蛋白2抗體0.2ml
Anthrax炭疽桿菌抗體規格:0.2ml
Phospho-PKCalpha/betaII(Thr638/641)磷酸化蛋白激酶Cα/β2抗體規格:0.1ml
KLK7*7抗體規格:0.2ml
RabbitAnti-MKIgM/APCAPC標記的兔抗猴IgM規格:0.1ml
phospho-FXYD1(Ser88)磷酸化磷酸神經膜抗體規格:0.1ml
小鼠黑色素瘤細胞；B16特性1000ml蠟樣芽孢桿菌顯色培養基（第三代）
即用型平板培養基
9cm*10/包酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂（YPD）平板
9cm*10個SDC(TSAW/TTC)平板
即用型無菌袋裝液體培養基
10個/包含225mlEC肉湯均質袋
10個/包含225ml蒸餾水均質袋
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