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技術(shù)文章

ELISA(雙抗體夾心法)檢測(cè)HBsAg

閱讀:756發(fā)布時(shí)間:2015-6-5

方法
1、ELISA試劑盒加入待測(cè)標(biāo)本每孔0.05ml,并設(shè)HBsAg陽(yáng)性對(duì)照2孔,HBsAg陰性對(duì)照2孔,空白對(duì)照1孔,然后加入酶結(jié)合物每孔1滴(0.05ml、空白對(duì)照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
2、洗板:棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿(mǎn)每孔,棄去拍干,反復(fù)五次后拍干。
3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鐘。
4、每孔加終止液1滴(0.05ml),混勻。
結(jié)果
ELISA試劑盒比色法:波長(zhǎng)450nm,先用空白孔校零點(diǎn),然后讀取各孔光密度值。
樣品OD值/陰性對(duì)照平均OD值≥ 2.1判斷為陽(yáng)性,否則為陰性。
備注:陰性對(duì)照平均OD值低于0.05作0.05計(jì)算,高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。陽(yáng)性對(duì)照OD值≥0.8,實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效。
注意事項(xiàng)
1、ELISA試劑盒置2℃~8℃保存。
2、使用前試劑應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加。
3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測(cè)標(biāo)本所需微孔條,置室溫平衡30分鐘后再行測(cè)試,余者應(yīng)及時(shí)封存于冰箱中以備后用。
4、待測(cè)標(biāo)本不可用NaN3防腐。
5、不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿通用。
6、結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。
7、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時(shí),請(qǐng)置37℃至溶解。
APOJ    載脂蛋白J抗體
APOH    載脂蛋白H抗體
ART4    二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4抗體
AKIRIN2    AKIRIN2蛋白抗體
ARL8B    ADP核糖基化樣因子8B抗體
ATAD2    三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗體
AKIRIN1    AKIRIN1蛋白抗體
ASZ1    錨定蛋白樣蛋白1抗體
Adenylate kinase 2    腺苷酸激酶2抗體
Acrosin    精子頂體前體蛋白抗體
AIM1L    黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體
AER61    未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體
FE65    鐵蛋白Fe65抗體
ARHI    抑癌基因ras同源家族1抗體
AP2 alpha    轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體
ANP    心鈉素抗體
AARS2    丙氨酰tRNA合成酶2抗體
AKAP12    *抑制蛋白激酶C底物抗體
Alpha-Synuclein    核突觸蛋白α抗體
APG4B    自噬相關(guān)蛋白4B抗體
ADAMTS12    整合素樣金屬蛋白酶與*1型-12抗體
alpha Actinin 4-Loading Control    α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體
Alkaline Phosphatase    堿性磷酸酶抗體
AU1 tag    AU1 tag標(biāo)簽抗體
AEBP1    脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1
AKT1    蛋白激酶B
AKT1    蛋白激酶B
ANGL2    血管生成素樣蛋白2抗體
Angiopoietin 4    血管生成素3/血管生成素4抗體


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