是子宮內(nèi)膜異位病患者受到異位內(nèi)膜的刺激，或經(jīng)血逆流等因素導(dǎo)致免疫應(yīng)答紊亂產(chǎn)生的一種自身抗體，并與子宮內(nèi)膜中靶抗原結(jié)合，在補(bǔ)體參與下，引起子宮內(nèi)膜免疫病理損傷，影響孕卵著床，也容易發(fā)生早期流產(chǎn)。目前檢測EMAb的方法有間接免疫熒光法（1FT）、雙向免疫擴(kuò)散法（1D）、間接血凝法（PHA）及ELISA法等。IFF法需刮取子宮內(nèi)膜制備抗原片，并需一定設(shè)備，不易普及開展，ID及PHA法的靈敏度與特異性均不高，現(xiàn)介紹間接ELISA法。ELISA試劑盒
1．ELISA試劑盒試劑
①子宮內(nèi)膜抗原：從子宮切除術(shù)取得的子宮內(nèi)剖取內(nèi)膜，用無菌生理鹽水洗去血塊，剪成lmm3小塊，懸入0．01mol／L，pH7．4PBS中（內(nèi)含*1
000U／mL，*50ug／mL，*100ug／mL，10％小牛血清）與0．25％膠原酶（collagenase Type
1）共育，通過250um,40um不銹鋼分樣篩，洗去膠原酶，收集篩網(wǎng)上子宮內(nèi)膜腺體，經(jīng)玻璃勻漿器勻漿后，1
000r／min離心20rain，棄沉淀，上清通過抗人全血清-Sepharose
4B柱，收集流洗液。濃縮后，雙向免疫擴(kuò)散與抗人全血清、抗*抗體之間應(yīng)無沉淀線，作為包被抗原；②HRP標(biāo)記的SPA結(jié)合物，用方陣法滴定zui適工作濃度。
2．操作步驟 ELISA試劑盒
在聚苯乙烯反應(yīng)板每孔加100uL子宮內(nèi)膜抗原（1：100），4T：，包被過夜，常法洗滌。用含15％小牛血清的pH7．40．01mol／LPBS封閉，45℃溫育1h，洗滌后加1：2稀釋的待測血清，45℃1h后洗滌，加底物（OPD-H202）溶液，于37％避光反應(yīng)5～15min，加H2S04終止反應(yīng)后，測492nm波長吸光度（A）值。以A值的X十2S為正常上限，大于或等于上限者為陽性。
3．臨床意義
正常婦女由于經(jīng)血逆流人腹腔對免疫系統(tǒng)的刺激，血清中有低水平EMAb存在（陽性率3％—7％），以中年婦女的陽性率zui高，閉經(jīng)后EMAb水平下降，漸趨消失。不孕、流產(chǎn)及子宮內(nèi)膜異位癥患者陽性率可達(dá)37％～50％。EMAb、抗精子抗體和弓形體感染是引起人類不孕、流產(chǎn)的3個主要因素，聯(lián)合檢測則更可以提高診斷的準(zhǔn)確性。
