夾心法ELISA試劑盒常見技術(shù)指南：
1、選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì)；若選擇兩個(gè)單抗，必須識(shí)別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對(duì)。
2、ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí)，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書，注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
4、一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度，建議過夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí)，如血清，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.
Aurora B 有絲分裂激酶B抗體
Aggrecanase-2 軟骨蛋白聚糖抗體
ADAM10 去整合素樣金屬蛋白酶10抗體
ASB9 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族9抗體
ASB8 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族8抗體
ABP1 植物生長激素ABP1抗體
ACTR1A 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體
AHSP α紅細(xì)胞分化相關(guān)因子抗體
ATP1 血管緊張素激活蛋白1抗體
AFM Alpha清蛋白抗體
AFAP1L2 AFAP1L2抗體
AHNAK 神經(jīng)細(xì)胞分化相關(guān)蛋白AHNAK抗體
AJAP1 粘合連接相關(guān)蛋白1抗體
ADAM13 去整合素樣金屬蛋白酶13抗體
Agrin 聚集蛋白抗體
AP2 alpha + beta 轉(zhuǎn)錄因子AP2α+β抗體
ELISA試劑盒
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