在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當。
ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反應一般在37℃經1-2小時，產物的生成可達。為加速反應，可提高反應的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜采用更高的溫度。但因所需時間太長，在ELISA中一般不予采用。
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應放在濕盒內，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育，反應板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應，操作時的室溫應嚴格限制在規定的范圍內，標準室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時，ELISA板只要平置于操作臺上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為保證這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板同時測定。
LIMS2 ILK結合蛋白LIMS2抗體
LNK 淋巴細胞特異性接頭蛋白抗體
LILRB2 細胞表面免疫球蛋白樣轉錄因子4抗體
LY6G6F 淋巴細胞抗原6重復位點蛋白G6F抗體
Leupaxin 樁蛋白抗體
LRPAP1 脂蛋白受體相關蛋白/低密度脂蛋白相關蛋白的相關蛋白1抗體
LEPREL2 皮屑樣蛋白2抗體
LAMA3 層粘蛋白α3抗體
LAMP1 溶酶體相關膜蛋白1抗體
Lxn/Latexin 羧肽酶抑制劑抗體
LCAT 卵磷酯*酰基轉移酶抗體
LPL/PLASTIN2 脂蛋白脂酶抗體
Leptin receptor 瘦素受體抗體
LRP6 低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體
Phospho-LRP6 (Ser1490) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體
Phospho-LATS1 (Thr1079) 磷酸化腫瘤抑制基因LATS1抗體
LRRK2 富*重復激酶2抗體
LRP 肺耐藥相關蛋白抗體
LRCH3 富含*重復家庭蛋白3抗體
LRRC10 富含*重復蛋白10抗體
ELISA試劑盒
