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細胞培養中無菌操作技術

閱讀:221發布時間:2016-5-26

ELISA試劑盒1. 實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌,以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養基相同亦不共享培養基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后,再進行下一個細胞株的操作。

2. 無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實驗用品用完即應移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在臺面的*無菌區域,勿在邊緣的非無菌區域操作。

3. 小心取用無菌的實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口,亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45° 角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

4. 工作人員應注意自身的安全,須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染的細胞株應特別小心操作,并選擇適當等級的無菌操作臺(至少Class II)。操作過程中,應避免引起aerosol 的產生,小心毒性藥品,例如DMSO 及TPA 等,并避免尖銳針頭的傷害等。

5. 定期檢測下列項目:

5.1. CO2 鋼瓶的CO2 壓力
5.2. CO2 培養箱的CO2 濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水,每周更換)。
5.3. 無菌操作臺內的airflow 壓力,定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜,預濾網(300小時/預濾網,3000 小時/HEPA)。

6. 水槽可添加消毒劑(Zephrin 1:750),定期更換水槽的水。

CRABP2    細胞維甲酸結合蛋白2抗體
C2orf80    2號染色體開放閱讀框80抗體
phospho-CD32B(Tyr291)    磷酸化CD32B抗體
Complement C3    過敏毒素C3(補體C3)抗體
CD66c    癌胚抗原相關細胞粘附分子抗體
CPEB1    細胞質多聚腺苷酸結合蛋白1抗體
CST7    半*蛋白酶抑制劑7抗體
C22orf29    22號染色體開放閱讀框29抗體
Contactin-1    神經細胞表面蛋白F3
Cathepsin C/DPP1    組織蛋白酶C抗體
Caspase 4    半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體
caspase-3 p12 subunit    活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗體
C7ORF61    7號染色體開放閱讀框61抗體
Claudin 11    少突膠質細胞跨膜蛋白抗體

ELISA試劑盒


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