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上海一基實業有限公司

主營產品: 標準品,培養基,Elisa試劑盒

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公司信息

人:
何先生
址:
上海市浦東新區張楊北路5972號
編:
200137
鋪:
http://www.cmr6829.com/st164954/
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豌豆胰蛋白酶抑制因子(STl)elisa試劑盒實驗操作步驟

2022-1-26 閱讀(254)

  使用目的:適用于檢測人動植物組織勻漿、細胞上清、血清、血漿、尿液或其他相關生物液體中濃度。本試劑盒只能用于科學研究,不得用于臨床診斷。
 
  檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法免疫吸附試驗(ELISA) 。往預先包被抗體的微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
 
  試劑盒規格配置:
 
自備物品:
 
  ①.酶標儀(450nm)
 
  ②.高精度加樣器及槍頭: 0. 5-10uL、2-20uL、 20-200uL、 200-1000uL
 
  ③.37 C恒溫箱
 
  操作步驟:
 
  ①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4'C。
 
  ②.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50 μL。
 
  ③.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
 
  ④.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP) 標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37C水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
 
  ⑤.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
 
  ⑥.每孔加入底物A、B各50μL, 37°C避光孵育15min。
 
  ⑦.每孔加入終止液50 μL,15min內, 在450nm波長處測定各孔的0D值。
 
  結果判斷:
 
  繪制標準曲線:在Exce I工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應0D值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。


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