使用目的：適用于檢測(cè)人動(dòng)植物組織勻漿、細(xì)胞上清、血清、血漿、尿液或其他相關(guān)生物液體中濃度。本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于臨床診斷。
檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) 。往預(yù)先包被抗體的微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值)，計(jì)算樣品濃度。
試劑盒規(guī)格配置：
自備物品：
①.酶標(biāo)儀(450nm)
②.高精度加樣器及槍頭: 0. 5-10uL、2-20uL、 20-200uL、 200-1000uL
③.37 C恒溫箱
操作步驟：
①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4'C。
②.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50 μL。
③.樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
④.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP) 標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37C水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
⑤.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min,甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
⑥.每孔加入底物A、B各50μL, 37°C避光孵育15min。
⑦.每孔加入終止液50 μL，15min內(nèi)， 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的0D值。
結(jié)果判斷：
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Exce I工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)0D值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
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