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進口elisa試劑盒講述sAc/Ds雙系統法的應用原理

閱讀:149發布時間:2016-12-5

進口elisa試劑盒sAc/Ds雙系統法克隆基因的原因及步驟 
1)將sAc和Ds分別與T-DNA連接,在農桿菌的幫助下分別轉入植物中,獲得sAc的轉化植株和Ds的轉化植株。 2)將sAc轉化株與Ds轉化株雜交,挑選同時含有sAc和Ds的子一代植株。 
3)雜合植株中,Ds在sAc產生的轉位酶幫助下轉座,引起某個基因突變,從而產生表型突變株。 
4)通過突變植株的自交和回交,選擇僅含有Ds而無sAc的植株,從而使變異得到穩定。建立對應于變異株的基因文庫或cDNA文庫。 
5)用IPCR的方法擴增與Ds相鄰的DNA片段,利用此片段作探針直接從基因文庫或cDNA文庫中篩選對應的基因克隆,通過DNA測序和比較了解該基因的特征。 
6)穩定的變異株再與sAc轉化株雜交,使得Ds再次轉位,使突變的基因得到恢復,從而得到回復突變株,用于檢驗所得到的基因是否對應于變異的基因。 
進口elisa試劑盒sAc/Ds雙系統法的應用 
用sAc/Ds雙系統法克隆基因,容易得到回復突變株和容易產生再次突變克隆其它基因,與T-DNA做基因標簽相比省去了再次轉化的繁瑣程序,為克隆基因的工作帶來了極大方便。 
理論上用sAc/Ds雙系統法克隆基因如果有足夠的轉化株,能克隆到任何一個基因,另外這種方法還可用于定點突變。如果對某一基因我們不知道它的表達產物,也不知道它何時在何部位表達,sAc/Ds雙系統法是一種較好的克隆基因的方法,該方法以其*的優點在克隆基因工作中將得到更廣泛的應用。
H6878-25G    8-Hydroxyquinoline 8-羥基喹啉    148-24-3
T5500-50G    2-Thiobarbituric acid  2-硫代巴比妥酸    504-17-6
T5500-10G    2-Thiobarbituric acid  2-硫代巴比妥酸    504-17-6
G8772-10G    Glass beads,acid-washed 玻璃珠    /
SL9010-250ml    Folin-Ciocalteu''''s Phenol Reagent 福林酚    /
D7299-10G    2`4-D 2,4-二氯苯氧乙酸    94-75-7
X0819-5G    Xylene Cyanol FF 二甲苯青FF    2650-17-1
X0819-1G    Xylene Cyanol FF 二甲苯青FF    2650-17-1
T0765-1G    TTC  2,3,5-氯化三苯基四氮唑    298-96-4
T0765-5G    TTC  2,3,5-氯化三苯基四氮唑    298-96-4
ER0201    Cfr42 I    
ER1881    HpyF3I    
ER1791    SsiI    
ER1661    FspAI    
ER1551    Psu I    
ER1501    Bfu I    
ER1452    BseX I    
ER1371    Sch I    
SM1293    MassRuler Express Reverse DNA Ladder Mix, ready-to-use    

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