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上海撫生實業有限公司
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閱讀:149發布時間:2016-12-5
進口elisa試劑盒sAc/Ds雙系統法克隆基因的原因及步驟
1)將sAc和Ds分別與T-DNA連接,在農桿菌的幫助下分別轉入植物中,獲得sAc的轉化植株和Ds的轉化植株。 2)將sAc轉化株與Ds轉化株雜交,挑選同時含有sAc和Ds的子一代植株。
3)雜合植株中,Ds在sAc產生的轉位酶幫助下轉座,引起某個基因突變,從而產生表型突變株。
4)通過突變植株的自交和回交,選擇僅含有Ds而無sAc的植株,從而使變異得到穩定。建立對應于變異株的基因文庫或cDNA文庫。
5)用IPCR的方法擴增與Ds相鄰的DNA片段,利用此片段作探針直接從基因文庫或cDNA文庫中篩選對應的基因克隆,通過DNA測序和比較了解該基因的特征。
6)穩定的變異株再與sAc轉化株雜交,使得Ds再次轉位,使突變的基因得到恢復,從而得到回復突變株,用于檢驗所得到的基因是否對應于變異的基因。
進口elisa試劑盒sAc/Ds雙系統法的應用
用sAc/Ds雙系統法克隆基因,容易得到回復突變株和容易產生再次突變克隆其它基因,與T-DNA做基因標簽相比省去了再次轉化的繁瑣程序,為克隆基因的工作帶來了極大方便。
理論上用sAc/Ds雙系統法克隆基因如果有足夠的轉化株,能克隆到任何一個基因,另外這種方法還可用于定點突變。如果對某一基因我們不知道它的表達產物,也不知道它何時在何部位表達,sAc/Ds雙系統法是一種較好的克隆基因的方法,該方法以其*的優點在克隆基因工作中將得到更廣泛的應用。
H6878-25G 8-Hydroxyquinoline 8-羥基喹啉 148-24-3
T5500-50G 2-Thiobarbituric acid 2-硫代巴比妥酸 504-17-6
T5500-10G 2-Thiobarbituric acid 2-硫代巴比妥酸 504-17-6
G8772-10G Glass beads,acid-washed 玻璃珠 /
SL9010-250ml Folin-Ciocalteu''''s Phenol Reagent 福林酚 /
D7299-10G 2`4-D 2,4-二氯苯氧乙酸 94-75-7
X0819-5G Xylene Cyanol FF 二甲苯青FF 2650-17-1
X0819-1G Xylene Cyanol FF 二甲苯青FF 2650-17-1
T0765-1G TTC 2,3,5-氯化三苯基四氮唑 298-96-4
T0765-5G TTC 2,3,5-氯化三苯基四氮唑 298-96-4
ER0201 Cfr42 I
ER1881 HpyF3I
ER1791 SsiI
ER1661 FspAI
ER1551 Psu I
ER1501 Bfu I
ER1452 BseX I
ER1371 Sch I
SM1293 MassRuler Express Reverse DNA Ladder Mix, ready-to-use
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