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elisa試劑盒檢測同型半*的其它幾種方法

閱讀:186發布時間:2017-1-16

進口elisa試劑盒zui早檢測同型半*是氨基酸分析法,Ueland等測定血清中同型半*,后經改良,目前常用方法包括以下幾種。

同位素法:由Refsum等1985年建立的方法。該方法通過14C標記的腺苷與HCY縮合后,經色譜分離,液體閃爍計數放射強度來測HCY濃度。該方法靈敏度高,特異性強,但操作繁瑣且有放射污染,未能推廣使用。

色譜法:1987年Stabler首先報道了氣相色譜―――質譜法測定同型半*。該法可同時測定半*、蛋氨酸、胱硫醚和甲基*等多種物質。雖然靈敏度、特異性好,但儀器價格昂貴而不能推廣。液相色譜法(HPLC)是目前比較成熟且推廣使用的方法,不足之處是樣品處理、層析條件、樣品檢測及定量的諸多變異,使其難以標準化。Fiskertrand等首先于1993年用全自動液相色譜法對血漿和尿液的HCY和硫醇物進行測定。HPLC根據衍生方式(柱前或柱后衍生)、檢測方法(熒光、電化學)可分為多種方法。應用HPLC準確測定同型半*需要優良的設備、高超的技術經驗和應用HPLC方法適當的時間,另外選擇和制備內部質控也相當重要。

免疫學法:該法應用特異性的抗S-腺苷同型半*單克隆技術,采用熒光偏振法或免疫法測定HCY.美國雅培公司采用全自動熒光偏振免疫技術,用AXSYM儀器檢測HCY,反應原理為:正常人血漿中HCY約1%以還原型存在,70%與白蛋白結合,30%形成小分子二硫化物。血漿標本在含二硫蘇糖醇的預處理液作用下,HCY、混合的二硫化物及蛋白結合型等均被還原成游離HCY形式(tHCY):tHCY在S-腺苷-L-同型半*(SAH)水解酶和過量腺苷存在下,被轉換成SAH;預稀釋的SAH混合物、抗-SAH單克隆抗體及標記的熒光S-腺苷-L-半*示蹤物一同孵育,儀器自動檢測偏振光的改變,即可測出標本總HCY水平。進口elisa試劑盒此方法快捷、操作簡單、自動化程度高,可減少人為誤差,具有良好的準確度與精密度,適合大多數臨床實驗室應用。

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