elisa酶聯(lián)免疫試劑盒巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)，使用兩對(而非一對)PCR引物擴(kuò)增完整的片段。實(shí)驗(yàn)步驟
*步：目標(biāo)的DNA模板藍(lán)色的*對引物結(jié)合。*對引物也可能結(jié)合到其他具有相似結(jié)合位點(diǎn)的片段上并擴(kuò)增多種產(chǎn)物。但只有一種產(chǎn)物是目的片斷（圖中未顯示可能的多種產(chǎn)物）。
第二步：使用圖中紅色標(biāo)記的第二套引物對*輪PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物進(jìn)行第二輪PCR擴(kuò)增。
由于第二套引物位于*輪PCR產(chǎn)物內(nèi)部，而非目的片斷包含兩套引物結(jié)合位點(diǎn)的可能性極小，因此第二套引物不可能擴(kuò)增非目的片斷。這種巢式PCR擴(kuò)增確保第二輪PCR產(chǎn)物幾乎或者*沒有引物配對特異性不強(qiáng)造成的非特異性擴(kuò)增的污染。
PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟
①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；
②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合；
③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。
140635-500 XTT 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒 500 次
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140634-500 MTS 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒 500 次
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140634-500 MTS 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒 500 次
140633-1000 熒光法死細(xì)胞檢測試劑盒 1000 次
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140632-1000 活/死細(xì)胞染色試劑盒（Calcein AM·PI） 1000 次
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140631-50 雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 647·7-AAD） 50 次
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140631-50 雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 647·7-AAD） 50 次
140631-20 雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 647·7-AAD） 20 次
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140630-50 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 594） 50 次
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140630-50 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 594） 50 次
140630-20 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 594） 20 次
140630-20 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 594） 20 次
140630-20 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 594） 20 次
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
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