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技術(shù)文章

elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟

閱讀:179發(fā)布時(shí)間:2017-5-19

elisa檢測(cè)試劑盒原理
利用雙抗體夾心技術(shù),將抗CEA的單克隆抗體包被于聚苯乙烯塑料珠上,制成固相抗體珠,用此珠去吸附樣品中的CEA,充分洗滌后再依次與酶標(biāo)記CEA抗體與底物反應(yīng),以成色后的吸光度值從劑量反應(yīng)曲線查得樣品中的cEA含量。
試劑
    1.CEA標(biāo)準(zhǔn)液 用純化CEA配制為濃度分別為0、1.5、3.0、10.0、20.ong/ml系列標(biāo)準(zhǔn)液。
    2.CEA抽提液0.Zmol/L醋酸鈉緩沖液(pHS.0)。
    3.基質(zhì)應(yīng)用液取鄰苯二胺80mg溶于pHS.O磷酸一拘攤酸緩沖液50ml中,56℃水浴中助溶。*溶后加人新鮮的30%HZ認(rèn)20川,混勻。此基質(zhì)液呈無(wú)色透明液體,若顯黃色不能使用。將此底物液貯于棕色瓶中,30而n內(nèi)用完。
    4.辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的抗CEA抗體。
    5.洗滌液0.osmol/LP贅(pH7.40)一0.1%Tween一20.
    6.抗CEA單克隆抗體包被的圓珠.
    7.待檢血樣血清(漿)。
操作步驟
    1.待檢抗原的制備取待檢血清或血漿0.sml,加0.Zmol/L醋酸鈉緩沖液
(pHS.o)1.oml,混勻后于70℃水浴內(nèi)15min。以3 000r/而n離心10而n。取上清液作
為3倍稀釋的待檢抗原。陽(yáng)性對(duì)照品必須同步處理。
    2.在20孔反應(yīng)板上每孔中加人上述(*步操作)待檢抗原0.Zml。同時(shí)加人
CEA標(biāo)準(zhǔn)抗原及陽(yáng)性對(duì)照抗原。每份樣品均作平行兩孔。
    3.用鑷子夾起CEA固相抗體珠,甩掉附著的液體后投人孔內(nèi)。反應(yīng)板上班蓋一張
干凈紙,將板漂浮于37℃水浴中反應(yīng)Zh。注意勿蓋水箱蓋,反應(yīng)完成后可連續(xù)操作或
置4℃過(guò)夜。
    4.用PBS一Tween一20洗滌液洗滌3次。每次加入洗滌液后放置3而n再抽凈(負(fù)壓抽吸)洗液。zui后一次洗液放人后靜置至準(zhǔn)備加酶標(biāo)記抗CEA之前時(shí)再抽凈。
    5.二抗液制備 取每支凍干的酶標(biāo)記抗CEA抗體用蒸餾水1.Oml溶解,因凍干時(shí)加有明膠保護(hù)劑,溶解時(shí)須放置37℃水浴中l(wèi)min。待充分溶解后再按要求稀釋至zui適工作濃度。
    6.將孔中洗滌液抽凈,每孔加人酶標(biāo)記抗CEA工作液0.Zml,將反應(yīng)板用干凈紙覆蓋后再漂浮于37℃水浴中反應(yīng)2h,勿蓋水箱蓋。
 elisa檢測(cè)試劑盒1,3-βD glu     小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶     規(guī)格:    48T/96T
 PSA     豌豆凝集素     規(guī)格:    48T/96T
 HIS     豚鼠組胺     規(guī)格:    48T/96T
 TGF-β1     豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1     規(guī)格:    48T/96T
 MHC/GPLA     豚鼠主要組織相容性復(fù)合體     規(guī)格:    48T/96T
 TNF-α     豚鼠腫瘤壞死因子α     規(guī)格:    48T/96T
 CH50     豚鼠血清總補(bǔ)體     規(guī)格:    48T/96T
 NO     豚鼠血清一氧化氮     規(guī)格:    48T/96T
 PAP     豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物     規(guī)格:    48T/96T
 AGEs     豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物     規(guī)格:    48T/96T
 GH     豚鼠生長(zhǎng)激素     規(guī)格:    48T/96T
 eNOS     豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶     規(guī)格:    48T/96T
 ET-1     豚鼠內(nèi)皮素1     規(guī)格:    48T/96T
 ET-1     豚鼠內(nèi)皮素1     規(guī)格:    48T/96T
 IgG     豚鼠免疫球蛋白G     規(guī)格:    48T/96T
 IgE     豚鼠免疫球蛋白E     規(guī)格:    48T/96T
 IgA     豚鼠免疫球蛋白A     規(guī)格:    48T/96T
 OVA sIgG     豚鼠卵清蛋白特異性IgG     規(guī)格:    48T/96T
 OVA sIgE     豚鼠卵清蛋白特異性IgE     規(guī)格:    48T/96T
 CGRP     豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽     規(guī)格:    48T/96T
 TIMP-1     豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1     規(guī)格:    48T/96T
 MMP-9     豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9     規(guī)格:    48T/96T
 LPO     豚鼠過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶     規(guī)格:    48T/96T
 Lebtospira     豚鼠鉤端螺旋體IgG     規(guī)格:    48T/96T
 HGF     豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子     規(guī)格:    48T/96T
 TE     豚鼠端粒酶     規(guī)格:    48T/96T
 MCP-4/CCL13     豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4     規(guī)格:    48T/96T
 FSH     豚鼠促卵泡素     規(guī)格:    48T/96T
 SOD     豚鼠超氧化物歧化酶     規(guī)格:    48T/96T
 iFABP     豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白     規(guī)格:    48T/96T
 EGF     豚鼠表皮生長(zhǎng)因子     規(guī)格:    48T/96T
 LTD4     豚鼠白三烯D4     規(guī)格:    48T/96T
 LTB4     豚鼠白三烯B4     規(guī)格:    48T/96T
 IL-4     豚鼠白介素4     規(guī)格:    48T/96T
 IL1Ra     豚鼠白介素1受體拮抗劑     規(guī)格:    48T/96T
 IL-12/P70     豚鼠白介素12     規(guī)格:    48T/96T
 IFN-γ     豚鼠γ干擾素     規(guī)格:    48T/96T
 TF     兔子組織因子     規(guī)格:    48T/96T
 t-PA     兔子組織型纖溶酶原激活劑     規(guī)格:    48T/96T
 TPA     兔子組織多肽抗原     規(guī)格:    48T/96T
 HIS     兔子組胺     規(guī)格:    48T/96T
 TGF-β1     兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1     規(guī)格:    48T/96T
 MHCⅢ/RLAⅢ     兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類     規(guī)格:    48T/96T
 TRAIL-R3     兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3     規(guī)格:    48T/96T
 TNF-α     兔子腫瘤壞死因子α     規(guī)格:    48T/96T
 NE     兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶     規(guī)格:    48T/96T
 ADP     兔子脂聯(lián)素     規(guī)格:    48T/96T
 Lp-PL-A2     兔子脂蛋白磷脂酶A2     規(guī)格:    48T/96T
 PROG     兔子孕激素/孕酮     規(guī)格:    48T/96T
 IGF-2     兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子2     規(guī)格:    48T/96T
 IGF-1     兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子1     規(guī)格:    48T/96T
 INS     兔子胰島素     規(guī)格:    48T/96T
 OxLDL     兔子氧化低密度脂蛋白     規(guī)格:    48T/96T
 PF-4/CXCL4     兔子血小板因子4     規(guī)格:    48T/96T
 PDGF     兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子     規(guī)格:    48T/96Telisa檢測(cè)試劑盒

 


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