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人胚腎細胞;293 HEK-293使用說明書

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更新時間:2017-01-19 13:43:17瀏覽次數:341次

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產品簡介

人胚腎細胞;293 [HEK-293]使用說明書,細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱  人胚腎細胞;293 [HEK-293]使用說明書
形態特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   早期報道中指出該細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA,但是現在明確了只存在其左側端的DNA。經過對Ad5的插入點的克隆測序發現,Ad5的1~4344位線性核苷酸整合入細胞染色體19q13.2。該細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主。可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級別為2級。 
培養條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:10~1:20傳代,每2~3天換液1次。
傳代情況  P20
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
同工酶  
染色體   
使用權限  A類

產品名稱人胚腎細胞;293 [HEK-293]使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

人胚腎細胞;293 [HEK-293]使用說明書復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人胚腎細胞;293 [HEK-293]使用說明書操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
ABCA5 英文名稱: 三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白A亞基5抗體  0.2ml

ADCK1 英文名稱: ADCK1蛋白抗體  0.2ml
ACBD4 英文名稱: 酰基*結合結構域蛋白4抗體  0.2ml
ABHD4 英文名稱: α/β水解酶4抗體  0.2ml
ADCK2 英文名稱: ADCK2蛋白抗體  0.2ml
ALDH16A1 英文名稱: 乙醛脫氫酶16家庭A1抗體  0.2ml
AMIGO3 英文名稱: 粘附分子IgG樣結構域蛋白3抗體  0.2ml
AKR1A1 英文名稱: 乙醇脫氫酶1抗體  0.2ml
ALAD 英文名稱: δ氨基乙酰丙酸脫水酶抗體  0.2ml
ALS2CR4 英文名稱: 肌側索硬化癥相關蛋白4抗體  0.2ml
alpha 2 Macroglobulin 英文名稱: α2巨球蛋白(α-2M)抗體  0.2ml
ACCSL 英文名稱: ACCSL蛋白抗體  0.2ml
AFP 英文名稱: 甲胎蛋白抗體  0.1ml
Mint3 英文名稱: β淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體  0.2ml
ASTN2 英文名稱: 星形肌動蛋白抗體  0.2ml
TREX1 英文名稱: 系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體  0.2ml
phospho-ATRIP (Ser68+Ser72) 英文名稱: 磷酸化系統性紅斑狼瘡先關蛋白TREX1抗體  0.1ml
Phospho-ATRIP (Ser224) 英文名稱: 磷酸化系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體  0.1ml
AP2M1 英文名稱: 接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體  0.2ml
Phospho-AP2M1 (Thr156) 英文名稱: 磷酸化接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體  0.1ml

豬食欲素受體(OXR)免疫試劑盒 Pig Orexin receptor,OXR ELISA Kit
豬食欲素/阿立新B(OX-B)免疫試劑盒 Pig Orexin B,OX-B ELISA Kit
豬*受體5(SSR5)免疫試劑盒 Pig Somatostatin receptor 5,SSR5 ELISA Kit
豬*(SS)免疫試劑盒 Porcine Somatostatin,SS ELISA Kit
豬生長激素抑制素受體5(SSTR5)免疫試劑盒 Pig Somatostatin receptor type 5,SSTR5 ELISA kit
豬生長激素受體(GHR)免疫試劑盒 Pig growth hormone receptor,GHR ELISA Kit
豬生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)免疫試劑盒 Porcine GHRP-Ghrelin ELISA Kit
豬生長激素(GH)免疫試劑盒 Porcine growth hormone,GH ELISA Kit
豬生長分化因子9(GDF9)免疫試劑盒 Pig Growth/differentiation factor 9,GDF9 ELISA kit
豬腎素(Renin)免疫試劑盒 Pig Renin ELISA Kit
豬腎上腺素(EPI)免疫試劑盒 Pig Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit
豬神經型一氧化氮合成酶(nNOS)免疫試劑盒 Pig Neuronal Nitric Oxide Synthase,nNOS ELISA Kit
豬神經特異性烯醇化酶(NSE)免疫試劑盒 Pig Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit
豬神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫試劑盒 Pig glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit
豬色素上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒 Pig pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit
豬三碘甲狀腺原氨酸(T3)免疫試劑盒 Pig Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit
豬乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒 Pig Lactoferrin,LF/LTF ELISA kit
豬乳酸脫氫酶(LDH)免疫試劑盒 Pig lactate dehydrogenase,LDH ELISA Kit
豬熱休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)免疫試劑盒 Pig Heat shock 70 kDa protein 1A,HSPA1A ELISA kit
豬熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒 Porcine HSP-70 ELISA Kit
豬熱休克蛋白60,線粒體(HSPD1/Hsp-60)免疫試劑盒 Pig 60 kDa heat shock protein,mitochondrial(HSPD1)ELISA kit
豬熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒 Porcine HSP-40 ELISA Kit
人胚腎細胞;293 [HEK-293]使用說明書豬去乙酰化饑餓激素(dGHRL)免疫試劑盒 Pig deacylated appetite-regulating hormone,dGHRL ELISA kit
豬*(NE)免疫試劑盒 Pig Noradrenaline,NE ELISA Kit
豬趨化因子配體28(CCL28)免疫試劑盒 Pig chemokine(C-C motif)ligand 28(CCL28)ELISA kit
豬(HYD)免疫試劑盒 Pig Hydrocortisone,HYD ELISA Kit

 


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