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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-01-19 16:14:24瀏覽次數(shù):211次
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人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5特性現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購(gòu)!
人胚胎膀胱組織來源細(xì)胞;CCC-HB-2復(fù)蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞名稱 人胚胎膀胱組織來源細(xì)胞;CCC-HB-2復(fù)蘇
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 取材自引產(chǎn)的11周男性胚胎組織,由中國(guó)醫(yī)學(xué)*基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:9,11;D16S539:11,13;D18S51:12,13;D19S433:13,14;D21S11:29;D2S1338:17,23;D3S1358:16;D5S818:9,11;D7S820:10,12;D8S1179:10,13;FGA:21,25;TH01:7,9;TPOX:8,11;vWA:14,16;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
人 | 成纖維細(xì)胞樣 | 上海 | 3-5天 |
人細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
HIV(Human anti-immunodeficiency virus antibody) ELISA Kit 人抗人類免疫缺陷病毒抗體 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
UU-Ab(Human Ureaplasma urealyticum antibody) ELISA Kit 人解脲脲原體抗體 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
CPSA(Human complex edprostate specific antigen) ELISA Kit 人復(fù)合前列腺特異抗原 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
HSV II -Ab(Human Herpes simplexvirus II antibody) ELISA Kit 人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit 人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
BV(Human bacterial vaginosis) ELISA Kit 人細(xì)菌病 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
HSV I Ab(Human Herpes simplexvirus I antibody) ELISA Kit 人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit 人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
HPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit 人狀瘤病毒抗體IgM Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
HPV-IgG(Human papillomavirus IgG) ELISA Kit 人狀瘤病毒抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
HSV-Ag2(Human Herpes simplex virus 2) ELISA Kit 人單純皰疹病毒抗原2 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
fPSA(Human Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit 人游離前列腺特異抗原 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
PSA(Human prostate specific antigen) ELISA Kit 人前列腺特異抗原 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48TFSH receptor 英文名稱: 促卵泡刺激素受體抗體 ?0.1ml
FGF12 英文名稱: 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子12抗體 ?0.2ml
FGF14 英文名稱: 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子14抗體 ?0.2ml
FABPB 英文名稱: 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 ?0.2ml
FAM96B 英文名稱: FAM96B蛋白抗體 ?0.2ml
FEZ1 英文名稱: 腦胚胎鋅指樣蛋白1抗體 ?0.2ml
FAM29A 英文名稱: FAM29蛋白抗體 ?0.2ml
FASP1 英文名稱: MaFF相關(guān)蛋白抗體 ?0.2ml
Factor VII 英文名稱: *7抗體 ?0.1ml
FEM 1B 英文名稱: FEM1B抗體 ?0.2ml
FGF3 英文名稱: 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子3抗體 ?0.1ml
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