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人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2特性

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更新時間:2017-01-19 16:19:14瀏覽次數:354次

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產品簡介

人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2特性現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

 

產品名稱生長特性發貨地貨期
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2特性成纖維細胞樣上海3-5天

細胞名稱  人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2特性
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉染外生包裝細胞Psi-2,Psi-2細胞產生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317,zui后將PA317產生的病毒顆粒導入正常的腎皮質近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有*抗性,但未用G418篩選轉導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。 
培養條件   DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS
傳代方法   1:4傳代;2~3天換液1次。
傳代情況  P9
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:13;D13S317:9;D16S539:11,12;D18S51:12;D19S433:15,15.2;D21S11:28,30;D2S1338:17,25;D3S1358:16,17;D5S818:12;D7S820:10,11;D8S1179:10,14;FGA:20,22;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:17,18;
同工酶  
染色體   57~60
使用權限  A類

來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
 Flotillin 2    英文名稱:    表皮細胞表面抗原1抗體    ?0.2ml
Factor IX    英文名稱:    *9抗體    ?0.1ml
Factor X    英文名稱:    *10抗體    ?0.2ml
Factor XI light chain    英文名稱:    *11輕鏈抗體    ?0.2ml
Factor XII heavy chain    英文名稱:    *12重鏈抗體    ?0.2ml
FIGNL1    英文名稱:    FIGNL1蛋白抗體    ?0.2ml
FAM70A    英文名稱:    FAM70A蛋白抗體    ?0.2ml
FIBCD1    英文名稱:    含纖維蛋白原C結構域蛋白1抗體    ?0.2ml
FbxO6    英文名稱:    F-box蛋白相關蛋白6抗體    ?0.2ml
phospho-FRS2(Tyr436)    英文名稱:    磷酸化成纖維細胞生長因子受體底物2抗體    ?0.1mlapo-A5(Human apoprotein A5) ELISA Kit  人載脂蛋白A5    Multi-class antibodies    規格:     48T
DBP(Human Vitamin D-binding protein) ELISA Kit  人*結合蛋白    Multi-class antibodies    規格:     48T
SEP1(Human selenoprotein 1) ELISA Kit  人硒蛋白1    Multi-class antibodies    規格:     48T
SAA3(Human serum amyloid A3) ELISA Kit  人血清淀粉樣蛋白A3    Multi-class antibodies    規格:     48T
Gbp4(Human guanylate nucleotide binding protein 4) ELISA Kit  人鳥苷酸結合蛋白4    Multi-class antibodies    規格:     48T
cytb561(Human lipocalin 2) ELISA Kit  人細胞色素b561    Multi-class antibodies    規格:     48T
LCN2(Human lipocalin 2) ELISA Kit  人脂質運載蛋白2    Multi-class antibodies    規格:     48T
aFABP(Human adipocyte fatty acid-binding protein) ELISA Kit  人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白    Multi-class antibodies    規格:     48T
GPC-3(Human Glypican-3) ELISA Kit  人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3    Multi-class antibodies    規格:     48T
GLUT3(Human Glucose transporter 3) ELISA Kit  人葡萄糖轉運蛋白3    Multi-class antibodies    規格:     48T
RBP(Human Retinol binding protein) ELISA Kit  人*結合蛋白    Multi-class antibodies    規格:     48T
8-OHdG(Human hydroxylysine) ELISA Kit  人8羥基脫氧鳥苷    Multi-class antibodies    規格:     48T

 

 


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